免疫組化染色呈陰性結(jié)果的原因有哪些?1)、抗體濃度和質(zhì)量問(wèn)題以及抗體來(lái)源選擇錯(cuò)誤。不知抗體是進(jìn)口的還是國(guó)產(chǎn)的工作液,怎么這么高稀釋度也沒(méi)能做出陽(yáng)性結(jié)果?另外,不是抗體濃度越高就越易出現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果,抗原抗體反應(yīng)有前帶和后帶效應(yīng),必須摸索比較好濃度。2)、抗原修復(fù)不全,對(duì)于甲醛固定的組織必須用充分抗原修復(fù)來(lái)打開(kāi)抗原表位,以利于與抗體結(jié)合;建議微波修復(fù)用高火4次*6min試試。有人做過(guò)實(shí)驗(yàn),這是比較好的時(shí)間和次數(shù)。若不行,還可高壓修復(fù)。3)、組織切片本身這種抗原含量低;4)、血清封閉時(shí)間過(guò)長(zhǎng)。5)、DAB孵育時(shí)間過(guò)短。6)、細(xì)胞通透不全,抗體未能充分進(jìn)入胞內(nèi)參與反應(yīng)。7)、開(kāi)始做免疫組化,我建議你一定要首先做個(gè)陽(yáng)性對(duì)照片,排除抗體等外的方法問(wèn)題。抗體芯片是將大量不同的抗原特異性結(jié)合的抗體有序地排列、固定于固相載體表面,形成微陣列。磁珠分選dc試劑盒
Q:多因子實(shí)驗(yàn)還用的樣本類型有可些?A:Serum(血清)、 sma(血漿)、Cell/Tissuelysate(細(xì)胞/組織裂解液)、CerebrospinalFluid(腦脊液)、BronchoalveolarLavageFluid(支氣管肺泡灌洗液)、NasalLavage(鼻腔灌洗液)、FluidPeritonealFluid(腹腔液)等等。Q:多因子實(shí)驗(yàn)中血清好檢測(cè),還是血漿好檢測(cè)?A:文獻(xiàn)報(bào)道EDTA的血漿適合做多因子實(shí)驗(yàn),具體需研究者根據(jù)自己實(shí)際條件選擇。Q:為什么要做預(yù)實(shí)驗(yàn)?A:試劑說(shuō)明書(shū)中的樣本稀釋比例不精確,需要進(jìn)一步確認(rèn)。預(yù)實(shí)驗(yàn)主要目的∶1.確定好較好稀釋比例,讓盡可能多的因子在檢測(cè)范圍內(nèi),從而提高檢出率。2.避免樣本濃度過(guò)高,導(dǎo)致結(jié)果不準(zhǔn)確。3.讓研究者在正式實(shí)驗(yàn)中有選擇的依據(jù)。Q:血清血聚溶血,對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果有形響嗎?A:肯定有影響。溶血是紅細(xì)胞破裂導(dǎo)致的,輕微溶血都是可以接受,但從溶血的嚴(yán)重程度看區(qū)別較大,樣本普遍存在些許溶血情況,從目前文獻(xiàn)上看沒(méi)有明確的數(shù)據(jù)支持。同生時(shí)代 多因子檢測(cè)本panel可檢測(cè)以下因子:IFN-γ,IL-1β,IL-2,IL-4,IL-5,IL-6,IL-10,IL-12p70,KC/GRO,TNF-α 種屬:Mouse。
酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)技術(shù)(Elispot)LabEx始終致力于為您的研究需要,提供前沿的多因子技術(shù)平臺(tái),用心服務(wù),現(xiàn)有囊括基因、蛋白、組織、細(xì)胞水平包括PCRArray、ELISA,MSD、Luminex、CBA,抗體芯片、多色流式、mIHC及HALO分析等12個(gè)專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室技術(shù)平臺(tái),助推科研進(jìn)步!隨著酶免疫分析技術(shù)在醫(yī)學(xué)及生物學(xué)領(lǐng)域的較廣的應(yīng)用,使體外檢測(cè)各種細(xì)胞因子和抗體研究有了新的突破。在研究免疫應(yīng)答機(jī)制時(shí),以往人們常用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)體液中游離的細(xì)胞因子(CK)或抗體,但由于游離的循環(huán)抗體或CK半衰期不同,使之在體液中不斷地被代謝,而不能確切地反應(yīng)體內(nèi)抗體及CK水平。80年代中期等根據(jù)ELISA技術(shù)的基本原理,建立了體外檢測(cè)特異性抗體分泌細(xì)胞和CK分泌細(xì)胞的固相酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)(ELISPOT)技術(shù),因其具有較高的特異性和敏感性,目前正被國(guó)內(nèi)外較廣的應(yīng)用,對(duì)探索自身免疫系統(tǒng)疾病發(fā)病機(jī)制具有重要意義。
ELISA法現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲(chóng)病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測(cè)定,根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果,認(rèn)為ELISA法具有靈敏、特異、簡(jiǎn)單、快速、穩(wěn)定及易于自動(dòng)化操作等特點(diǎn)。不僅適用于臨床標(biāo)本的檢查,而且由于一日之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標(biāo)本,因此,也適合于血清流行病學(xué)調(diào)查。本法不僅可以用來(lái)測(cè)定抗體,而且也可用于測(cè)定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。LabExELISA服務(wù)流程:咨詢—確認(rèn)樣本和試劑盒信息—報(bào)價(jià)—簽合同—確認(rèn)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果---正式實(shí)驗(yàn)。LabEx提供空白板,buffer緩沖液等客戶只需提供樣本,結(jié)果形式:統(tǒng)計(jì)結(jié)果,實(shí)驗(yàn)流程,全程提供疑問(wèn)解答.本panel可檢測(cè)以下因子:Akt,GSK-3β,p70S6K 種屬:Human,Mouse,Rat。
本panel可檢測(cè)以下因子:BCMA/TNFRSF17,CathepsinS,CD23/FcepsilonRII,CD44,CEACAM-1/CD66a,CoagulationFactorXIV/ProteinC,ComplementC2,CX3CL1/Fractalkine,CXCL7/NAP-2,CXCL9/MIG,CXCL14/BRAK,D-dimer,Endocan/ESM-1,Endostatin,FGF-23,Fibronectin,Galectin-9,Gas6,HE4/WFDC2,HGFR/c-MET,HTRA2/Omi,IGFBP-2,IGFBP-rp1/IGFBP-7,IL-27,ITIH4,LRG1,Lumican,Lymphotoxin-alpha/TNF-beta,MICB,Midkine,NCAM-1/CD56,beta-NGF,NT-4,Osteoprotegerin/TNFRSF11B,Park7/DJ-1,PBEF/Visfatin,Pentraxin3/TSG-14,Procalcitonin,Reg3A,S100A8,SCGF/CLEC11a,SerpinA7/TBG,SerpinC1/Antithrombin-III,SerpinF1/PEDF,Syndecan-4,Tau,uPAR種屬:Human本panel可檢測(cè)以下因子:STAT3 (Total),STAT3 (Tyr705) 種屬:Human,Mouse。mapk信號(hào)通路抑制劑
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LUMINEX常見(jiàn)問(wèn)題及解答(一)1)LUMINEX應(yīng)用于哪些領(lǐng)域?生物醫(yī)學(xué)研究,生物標(biāo)記物開(kāi)發(fā),臨床檢測(cè)等領(lǐng)域。Luminex技術(shù)主要用于蛋白和核酸檢測(cè)分析。2)LUMINEX敏感性如何?靈敏度取決于開(kāi)頭的質(zhì)量。對(duì)于同樣的抗體對(duì),Luminex檢測(cè)的靈敏度高于ELISA技術(shù)。一般檢測(cè)靈敏度在pg級(jí)。3)對(duì)不同類型的樣品制備和樣品量的要求是怎樣的?血清、血漿是常用的樣本,每次檢測(cè)需要10ul,每次可以檢測(cè)多個(gè)蛋白。從各種細(xì)胞或組織中提取的蛋白也可以用Luminex技術(shù)檢測(cè),制備方法與ELISA、WesternBlot完全一樣。4)一般可以檢測(cè)到多少基因或蛋白的表達(dá)信息?檢測(cè)蛋白和基因的數(shù)目主要取決于試劑盒。蛋白質(zhì)檢測(cè)目前可以達(dá)到50個(gè)左右,基因檢測(cè)可達(dá)500個(gè)。5)如何保證檢測(cè)結(jié)果的特異性?檢測(cè)的特異性取決于抗體高特異性。試劑幾乎全部來(lái)源于美國(guó)大公司,產(chǎn)品經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的質(zhì)量控制。同時(shí),我們檢測(cè)公司也有近15年的經(jīng)驗(yàn)、嚴(yán)格的操作程序和質(zhì)量控制體系。磁珠分選dc試劑盒
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