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多因子檢測luminex

來源: 發(fā)布時間:2023-07-08

多重熒光免疫組化,主要的技術原理來自TSA技術,TSA即酪酰胺信號放大技術(Tyramidesignalamplification),是一類利用辣根過氧化酶(HRP)對靶蛋白或核酸進行高密度原位標記的酶學檢測方法。該技術可與高性能染料AlexaFluor、傳統(tǒng)熒光染料和比色檢測系統(tǒng)相兼容。簡單來說,用這種方法做多重免疫熒光是利用二抗上帶有的HRP(而不是直接偶聯(lián)熒光素),來催化后續(xù)添加入體系的非活性熒光素。熒光素在HRP和過氧化氫的作用下被活化,跟臨近蛋白的酪氨酸殘基共價偶聯(lián),使得蛋白樣品與熒光素穩(wěn)定結合。然后微波處理,前一輪非共價結合的抗體被洗掉,共價結合的熒光素還留存在樣品上。再換個一抗來第二輪孵育,周而復始。等到所有抗體孵育結束,熒光素都結合好后,然后去檢測結果。LabEx抗體芯片主要用于蛋白表達譜、蛋白質(zhì)磷酸化及蛋白質(zhì)相互作用等檢測。多因子檢測luminex

Q:ELISA實驗預實驗的目的?A:確認一下樣本的稀釋比例,雖然試劑盒給出了一些建議,但是不同客戶的樣本處理方式不同,可能會出現(xiàn)高出標準曲線的情況,那就要預實驗測試看下B、降低客戶的預期,如果預實驗反饋出,客戶的結果在檢測下限附近,可以讓客戶更換樣本,節(jié)省試劑盒Q:ELISA實驗預實驗是如何安排的?A:會做整條標準曲線,比較好由客戶自己挑選的有代表性的預實驗樣本,至少2個(高值與低值各一,各4個稀釋梯度),**少耗費16個孔;若客戶吝惜試劑,可只做標準曲線的兩個點(比較高點和背景點,確認預實驗樣本的濃度是否在背景點以上或者是附近),預實驗樣本做幾個稀釋度測試(至少2個樣本各3個稀釋度),**少耗費8個孔;為避免樣本反復凍融或正式實驗樣本不夠,預實驗樣本需要另外準備;電化學發(fā)光分析儀msd液態(tài)流式技術(Luminex),流式熒光,又稱懸浮陣列、液相芯片等。

Luminex液相懸浮芯片利用梯度稀釋的標準品檢測信號,構建標準曲線,還可對96孔微孔板中的樣品的多種細胞因子進行同步相對定量。Luminex液相懸浮芯片的技術優(yōu)勢遠超傳統(tǒng)ELISA,特別適合大批量樣本中多個特定因子的定量檢測。由于Luminex懸浮芯片的規(guī)格是1張芯片可以檢測多達78例樣本,許多研究人員在日常實驗研究(例如動物實驗、細胞實驗)中往往只有十幾例到幾十例不等的樣品需要檢測,用整張Luminex芯片就存在浪費情況。為幫助廣大研究人員在樣本數(shù)量較少的時候也能夠享受Luminex芯片技術帶來高質(zhì)量數(shù)據(jù)及便利。LabEx推薦出使用頻率和穩(wěn)定性均靠前的Luminex芯片開展全國研究人員“拼板”業(yè)務。每張芯片多可檢測80例樣本,參與拼板的項目10例起拼,拼板成功立即啟動實驗,兩周內(nèi)即出報告!

基于流式平臺CBA:CBA(CytometricBeadArray),即微量樣本多指標流式蛋白定量技術是一個基于流式細胞檢測系統(tǒng)的多重蛋白定量檢測方法,它能夠同時對單個樣品中的多個指標進行檢測。CBA的原理通過利用一系列帶有熒光標記的微小、分散的微球連接特定的捕獲抗體以捕捉溶液系統(tǒng)中的待測物,通過對應各種不同檢測物的特異微球上所帶有熒光強度不同從而同時測定分析樣本中多種可溶性成分的數(shù)量。CBA的特點:1.能夠同時對單個樣本進行多種檢測。2.較傳統(tǒng)檢測節(jié)省樣本量9倍。3.靈敏度高、重復性好。4.所有分析只需一組標準曲線。5.避免酶聯(lián)反應所致人工假象。6.節(jié)省操作和檢測時間。LabEx提供 AKT、MAPK、Apoptosis等經(jīng)典信號通路研究。

液態(tài)流式技術(Luminex)特點:多重檢測:理論上可同時檢測100種生物靶標。節(jié)省樣品:只需低至25μl的樣品體積。高靈敏度:精確定量下限低至0.1pg/mL。應用范圍應用領域:免疫、炎癥、心血管疾病、腫塊物研究、腎、代謝、神經(jīng)、細胞間作用。分析物類型:細胞因子、炎癥因子、趨化因子、粘附因子、脂肪因子、血管生成蛋白、腫塊物標記物、基質(zhì)金屬蛋白酶、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑。其他應用:信號通路、重大疾病相關、Biomarker開發(fā)、臨床應用。微球免疫分析系統(tǒng)CBA是一個基于流式細胞檢測系統(tǒng)的多重蛋白定量檢測方法。MIP-5檢測服務

LabEx多因子檢測技術應用。多因子檢測luminex

抗體芯片介紹:ELISA原理的高通量WB,單一樣品多種分析物的檢測。具有微型化、集成化、高通量的特點,可以用于檢測某一特定的生理或病理過程相關蛋白的表達豐度,目前主要用于信號轉導、蛋白組學、腫塊物及其他疾病的相關研究。R&D的多因子固相抗體芯片?每個試劑盒可檢測4個樣本,每個樣本可同時檢測多達119個分析物,實驗可在一日內(nèi)完成?每個試劑盒提供4張膜,膜上監(jiān)測點以復孔的形式包被捕獲抗體和對照抗體?該即用型試劑盒包含抗體膜,檢測抗體和緩沖液等所有組分優(yōu)勢和特點?使用方便,節(jié)省時間和成本?無需專門設備?高通量:1天所得到的數(shù)據(jù)相當于免疫印跡幾周所得數(shù)據(jù)?樣本類型多樣化?每種試劑盒均驗證過多種樣本,如細胞裂解液,組織裂解液,細胞培養(yǎng)上清,血清,血漿,唾液,尿液或牛奶等?節(jié)省樣本?獲取相同數(shù)據(jù)點所需樣本量遠低于WB?比競爭對手抗體芯片所需樣本量更少,獲得的數(shù)據(jù)更多LabEx提供28種抗體芯片,用于人,小鼠和大鼠物種的蛋白檢測相關服務,我們?yōu)槟峁┩暾膶嶒灲Y果報告,包括數(shù)據(jù)分析結果,原始數(shù)據(jù)文件,實驗protocol等。多因子檢測luminex

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