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皮克級數(shù)字ELISA高速檢測

來源: 發(fā)布時間:2024-12-26

芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品

每個生物實驗室都用得起的單分子免疫檢測

我們已經(jīng)開發(fā)了兩種臨床相關(guān)蛋白的檢測方法——前列腺特異性抗原(PSA)和腫瘤壞死因子α(TNF-α),以確定高酶標(biāo)記物單體提供的靈敏度轉(zhuǎn)化為高靈敏度的檢測方法血液中的蛋白質(zhì)。兩種蛋白質(zhì)的數(shù)字ELISA如圖1所示。開發(fā)這些試驗的關(guān)鍵參數(shù)是:珠子濃度和兩種標(biāo)記試劑(檢測試劑和酶偶聯(lián)物)的濃度。珠子濃度的選擇取決于幾個相互競爭的因素。首先,足夠的珠子必須在場以從熱力學(xué)和動力學(xué)中捕獲大部分目標(biāo)分析物從熱力學(xué)角度看,100μL中有20萬個珠子,每個珠子大約有8萬個與之結(jié)合的抗體25相當(dāng)于約0.3nM的抗體濃度,在該濃度下,抗體-蛋白平衡導(dǎo)致高捕獲效率(>70%)(D.M.R.,E.P.F.,D.C.D.,未發(fā)表工作)。 芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA,超敏檢測,理論可達飛克級;皮克級數(shù)字ELISA高速檢測

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創(chuàng)新性的解決方案:芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA

我公司推出的數(shù)字化高靈敏ELISA芯片檢測產(chǎn)品應(yīng)用場景:適合生物實驗室、醫(yī)學(xué)實驗室、科研市場、產(chǎn)品預(yù)研、產(chǎn)品開發(fā)、ELISA檢測、動物病情檢測等各種應(yīng)用場景應(yīng)用范圍:各種高靈敏多重免疫檢測,可替代各種ELISA試劑盒,及其他免疫檢測產(chǎn)品。

光纖束購自SchottNorthAmericaouthbri,非增強型光澤硅片購自SpecialtyManufacturing(Saginaw,NatBiotechnol.作者手稿;可在PMC2010年12月1日獲得。Rissin等人,第7頁鹽酸、無水乙醇和分子生物學(xué)級別的吐溫-20均購自西格瑪-奧德里奇(圣路易斯,密蘇里州)。2.7-μm-二羧基磁珠購自瓦里安公司(加利福尼亞州萊克福斯特)。單克隆抗人TNF-α捕獲抗體、多克隆抗人TNF-α檢測試劑和重組人TNF-α均購自R&DSystems(Minneapolis,MN)。單克隆抗PSA捕獲抗體、單克隆抗PSA檢測試劑和純化的PSA購自BiosPacific(埃默里維爾,加利福尼亞州);使用標(biāo)準(zhǔn)方法將檢測試劑抗體生物素化。1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)、N-羥基磺基琥珀酰亞胺(NHS)和SuperBlock®T-20封閉緩沖液購自ThermoScientific(Rockford,IL)。純化DNA購自綜合DNA技術(shù)公司(Coralville,IA)。 醫(yī)學(xué)實驗室數(shù)字ELISA微量樣本芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA,低成本單分子檢測;

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為了證明檢測極低濃度的可能診斷價值使用數(shù)字ELISA檢測血液中的蛋白質(zhì),對接受治理性前列腺切除術(shù)(RP)的患者血清樣本中的PSA進行了測量。PSA是前列腺病的血清生物標(biāo)志物病癥既用作篩查工具,也用于監(jiān)測住院患者的復(fù)發(fā)接受治理性前列腺切除術(shù)28。治理性前列腺切除術(shù)后,絕大多數(shù)PSA被消除,水平低于標(biāo)準(zhǔn)商用檢測方法的檢測限(3pM或0.1ng/mL)。定期監(jiān)測這些患者的PSA恢復(fù)情況可以檢測前列腺病的復(fù)發(fā),但術(shù)后幾年內(nèi)生化復(fù)發(fā)可能不會被發(fā)現(xiàn)。

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將200,000個功能化DNA捕獲探針與100μL孵育含有目標(biāo)DNA的溶液(5‘-TTGACGGCGAAGACCTGGATGTATTGCTCCTCTGAACGGTAGCATCTTGACAAC-3‘孵育2小時后,移除DNA靶標(biāo)溶液,用0.2×SSC緩沖液洗滌珠子三次含有0.1%Tween-20的微球重新懸浮并與10nM混合生物素標(biāo)記的信號探針(5‘-TACATCCAGGTCTTCGCCGTCAA/生物素/-3’)對目標(biāo)DNA具有特異性,孵育1小時。然后將珠子在去除信號探針后用含0.1%吐溫-20的0.2×SSC緩沖液洗滌三次。隨后向珠子沉淀中加入10pMS阝G溶液,混勻并混合1小時。然后將珠子分離并在含0.1%吐溫-20的5×PBS緩沖液中洗滌六次。重懸于10μLofPBS中并加載到飛升微升孔陣列上。 芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA,微量多重檢測,微量樣本就能同時測試4項指標(biāo);

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單分子POCT產(chǎn)品,幫您數(shù)字化高靈敏檢測,且微量樣本多重指標(biāo)檢測;

低成本便捷檢測:數(shù)字ELISA芯片,分為手動版和自動版,其中手動版可以直接使用移液槍加液檢測;更少可以使用單片4孔芯片(同時做4個test)、8孔芯片(同時做8個test)進行檢測;(活動期8孔芯片只需要200元即可測試實驗);芯片內(nèi)只需要微量樣本(10-20ul)即可完成檢測,所需要的試劑量也明顯降低,且每個芯片孔內(nèi)可同時檢測2-4個檢測指標(biāo),分?jǐn)傁聛頇z測成本有效降低;其中自動版可搭配小型多通道加樣儀,也可以進行高通量的ELISA芯片同時檢測。1)檢測快速:數(shù)字ELISA芯片高敏檢測試劑盒,搭配預(yù)埋的磁珠和熒光量子點試劑,整體反應(yīng)在芯片的微小流道內(nèi)進行,反應(yīng)速度快、清洗速度快;更短只需要15-20min,就可以進行完整的檢測流程,接近POCT檢測產(chǎn)品,可以有效節(jié)省您的實驗時間。2)高靈敏檢測數(shù)字ELISA高靈敏度檢測芯片,使用單分子免疫檢測的原理(原理同simoa等產(chǎn)品,使用反應(yīng)微球單分散陣列排布的原理,將反應(yīng)信號進行單分子單分散檢測),在快速、便捷檢測的同時,仍能保持高靈敏度,常規(guī)指標(biāo)輕松達到0.2-1pg/ml的靈敏度 7)數(shù)字化高敏ELISA芯片,低成本、便捷、快速進行微量樣本的檢測;皮克級數(shù)字ELISA高速檢測

芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA,極速檢測,檢測用時只需要 15-30min!皮克級數(shù)字ELISA高速檢測

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由于活性珠子的百分比接近50%(酶與微球的比例大于~1:1.5),然而,使用圖像分析軟件區(qū)分“開啟”和“關(guān)閉”孔變得具有挑戰(zhàn)性,我們達到了數(shù)字動態(tài)范圍的實際上限。例如,圖2中7fM(~45%活性)的信號偏離了線性。因此,這里使用50,000個孔展示的數(shù)字線性動態(tài)范圍是從3.5fM到350zM,即大約四個對數(shù)單位。前提是蛋白質(zhì)使用適當(dāng)?shù)拿笣舛冗M行標(biāo)記,這種動態(tài)范圍對于許多臨床應(yīng)用來說是足夠的 皮克級數(shù)字ELISA高速檢測