不同種類的納米顆粒轉染細胞系后，產生不同的效率、毒性和組織特異性。這些大量的測試表明，納米顆粒作為載體的效率與普通的非病毒轉染方法相當。Tabatt等人所做的研究比較了使用脂質體、陽離子固體li-pid納米顆粒和兩種商用轉染劑對COS-1細胞系(非洲綠猴腎成纖維細胞樣細胞)使用四種不同的轉染介質所取得的轉染效果。固體脂質na-noparticles轉染組和溶酶體(均由DOTAP -N -(1-(2,3-二聚乙氧基)丙基)-N,N,N-三甲基硫酸銨)轉染組的熒光素酶基因表達效率沒有統(tǒng)計學上的***差異，在每種轉染介質中保持相同水平。然而，獲得的轉染效率低于使用商業(yè)轉染劑EscortTM 的效率，該轉染劑由DOPE(1,2-二-(順式-9-十八烷基)- n-甘油-3-磷酸乙醇胺)組成。研究人員通過在HepG2細胞(人肝細胞肝*細胞系)上使用固體脂質納米顆粒，實現了與市買的lipo-fectamine相同的綠色熒光蛋白和熒光素酶蛋白表達水平。南京星葉生物正是利用將核酸封裝在納米級脂質體囊泡中的技術，開發(fā)出了Gemate系列轉染試劑。江蘇小鼠轉染試劑

PHP是由天然來源的羥基脯氨酸(如膠原蛋白、明膠和其他蛋白質)制成的，是***個用作基因載體的聚酯。在生理環(huán)境中，PHP可以在不到兩個小時的時間內失去其初始分子量的50%。然而，PHP完全分解為其等效單體需要三個月的時間，分解產物是單體羥脯氨酸。雖然PHP酯在溶液中單獨存在時降解很快，但與DNA絡合時更穩(wěn)定。將PHP酯/pSV-gal復合物轉染CPAE細胞，測定PHP酯作為基因傳遞載體的活性。由于聚L-賴氨酸是**常用的基因轉運聚合物，PHP酯的轉染效率與聚L-賴氨酸相當。轉染效果隨著PHP酯濃度高于DNA濃度而增加。PHP酯轉染細胞的能力不受FBS存在的影響。結果表明，PHP酯是一種潛在的基因載體。湖北DOTAP 轉染試劑在轉染中，DNA通常通過病毒或非病毒載體(如質粒)轉運到宿主細胞中。

在7種轉染試劑(DAC-30、DC-30、Lipofectin、LipofectAMINEPLUS、Effectene、FuGene 6和superect)中，FuGene 6轉染HASMCs和α-10 SMCs的效率比較高。在這兩種細胞系中，superect產生的細胞毒性作用比較高，其次是DAC-30和Lipofectamine Plus，而FuGene 6被認為對細胞系相對安全。在另一項比較人類和動物來源的不同細胞系轉染結果的研究中，豬氣管上皮細胞(PTE)被Effectene、Lipofectamine Plus和PEI等轉染試劑轉染的效率高于人類氣管上皮細胞(HTE)?；瘜W轉染后，轉染后的HTE也表現出比PTE更低的活力。兩項被引用研究的綜合結果認為動物細胞系可能比人類細胞系更有效地轉染。懸浮細胞通常被認為比貼壁細胞更難轉染，因為轉染復合物對細胞的潛在附著減少懸浮細胞表面。然而，一項比較Xfect、Lipofectamine2000、Nanofectamin、TransIT-X2和TransIT-2020效率的研究表明，除了Xfect之外，所有試劑轉染懸浮細胞的效率都高于貼壁細胞(Tammetal.，2016)。然而，相反觀察結果背后的原因在很大程度上仍不清楚，未來可能會進一步探索。核酸與轉染試劑的比例

在大腸桿菌細胞中復制的質粒通常含有二核苷酸頻率為1:16的CpG基序，這與細菌DNA中的頻率相似。CpG免疫刺激的兩個應用領域是疫苗接種和腫瘤免疫***。許多出版物表明，免疫刺激CpG基序可以用于疫苗接種策略，包括給藥編碼抗原的pDNA載體或給藥抗原本身。通過不同的給藥途徑給藥含CpG的脂叢可以抑制**生長。這些結果來源于使用表達促炎細胞因子(如IL-12)的轉基因或甚至不含外源轉基因的載體的研究。**的生長抑制似乎是由CpG基序引起的，因為這些序列的甲基化否定了這種作用。雖然有***效果，但含CpG基序對**生長的抑制的確切性質尚不清楚。產生的細胞因子對腫瘤細胞和**脈管系統(tǒng)都有多重作用。一個恰當的例子是IL-12的能力，在響應含CpG基序時產生，引發(fā)抗血管生成反應。其他細胞因子，如IFN-g(自身為CpG誘導的細胞因子)誘導的細胞因子，即IP10和Mig，也能夠具有抗血管生成特性。基因是陽離子聚合物作為轉染劑的主要應用。

基因注射包括通過注射將所需的核酸物質直接輸送到宿主細胞核中。當細胞轉染具有挑戰(zhàn)性時，特別是當需要對宿主細胞進行遺傳修飾時，這種方法是一種很好的替代方法。與其他非病毒基因傳遞方法一樣，沒有一種方法可以適用于所有不同的細胞類型，選擇合適的細胞類型和核酸大小對于確?；蜃⑸涞某晒χ陵P重要。例如，先前的一項研究報道了成功生成表達cre重組酶(大小～1,000bp)的轉基因小鼠細胞系。另一方面，在一項體內研究中，表達轉基因的小鼠肌纖維數量與注射次數和給藥質粒劑量相關。另一項體外研究進一步支持了這一觀點，該研究報道了表達報告基因的宿主細胞的數量與注入細胞的核酸量密切相關。此外，微針的大小、形狀和額外涂層的存在也會影響基因注射的效率，因為有報道稱，涂有微顆粒的小尺寸微針(<10毫米)能夠順利地將所需的貨物輸送到皮膚的角質層。PEI的分子量對細胞毒性和基因轉移活性有影響。mRNA轉染試劑幫轉染

轉染時推薦使用血清減少或無血清培養(yǎng)基包括陽離子轉染試劑，如Lipofectamine、HiperFect 和EndofectinMax。江蘇小鼠轉染試劑

PEI的分子量對細胞毒性和基因轉移活性有影響。由于PEI在細胞內不可降解，所以分子量越高，細胞毒性越強。此外，具有較高分子量的PEI形成更穩(wěn)定的聚合物，使其更容易轉染，但更難在細胞內釋放核酸。另一方面，PEI產生的復合物分子量降低，更難以轉染;但它更容易釋放核酸。因此，確定哪種分子量的PEI更有利是不能隨意實現的。然而，一些改進使PEI在應用中更加先進。低分子量(LMW) PEI與可生物降解的骨架(如聚谷氨酸衍生物(PEG-b-PBLG))偶聯，可***降低細胞毒性并保持較高的轉染效率。通過用丙烯酸乙酯修飾胺，伯胺的乙?；蛟诰酆衔锝Y構中引入帶負電荷的丙酸或琥珀酸基團，可以制備出各種無毒的分支PEI衍生物。由此產生的化學物質在利用siRNA敲低靶基因方面非常成功。江蘇小鼠轉染試劑