HEPES使用方法有兩種：(1)HEPES可按所需的濃度直接加入到配制的培養(yǎng)液中，再過濾除菌。每1000ml培養(yǎng)液中加入2.38克HEPES，待溶后用lNNaOH調(diào)pH至7.2，濾過除菌后使用。此時HEPES的使用濃度為10mmol/L。(2)亦可配成100x貯存液(lmol/L)，使用前取99ml培養(yǎng)液加入lml貯存液，**終應(yīng)用濃度仍為10mmol/L。lmol/L(100x)HEPES貯存液配制方法：取23.8gHEPES溶于90ml雙蒸水中，用lNNaOH調(diào)pH至7.5一8.0，然后用水定容至100ml，過濾除菌，分裝小瓶(2ml/瓶)，4℃或-20℃保存。需要注意的是，HEPES緩沖液的使用終濃度為10-50mmol/L，對細胞無毒性作用。一般情況下，濃度為20mmol/L的HEPES即可達到緩沖能力?，F(xiàn)在市售HEPES為約10g包裝的小瓶，大家根據(jù)實際情況正確靈活配制就OK了注射級，低內(nèi)***、國產(chǎn)化穩(wěn)定供應(yīng)、高性價比注射級HEPES找AVT。四川有登記號HEPES價格

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生物緩沖劑在生物實驗中會經(jīng)常被用到，它們種類繁多，可能你需要的緩沖劑和你選的緩沖劑表面符合，實際使用時就存在一定的差異，所以選好合適的緩沖劑是很有必要的；同時，不同緩沖液差別也很大。湖北新德晟帶你來聊聊Tris-HCl緩沖液與HEPES緩沖液的之間的區(qū)別。Tris-HCl緩沖液Tris緩沖液是在生物化學(xué)研究中使用較***的一種緩沖劑，其本身為弱堿，常用有效pH在“中性”范圍，Tris-HCl緩沖液：pH＝7.5～8.5；Tris-磷酸鹽緩沖液：pH＝5.0～9.0。Tris-HCl緩沖液優(yōu)點1、Tris-HCl緩沖液穩(wěn)定，與生理體液的相容性好（Tris-HCl與鈣、鎂離子不會形成沉淀；相反，磷酸鹽與鈣、鎂離子會產(chǎn)生沉淀）；2、而且相同PH，相同濃度的Tris-HCl緩沖液的離子強度低，這對酶類測定尤為重要，因為大離子強度易致有些酶失活。因此，有時用Tris-HCl代替磷酸鹽緩沖液，效果更好。

外源基因?qū)胝婧思毎姆椒ㄓ泻芏喾N，如磷酸鈣轉(zhuǎn)染法、DEAE-葡聚糖轉(zhuǎn)染法、脂質(zhì)體法、電穿孔法、顯微注射法等。2×HEPES緩沖鹽溶液主要用于磷酸鈣轉(zhuǎn)染，其主要成分為HEPES，HEPES是一種非離子兩性緩沖劑，能有效控制pH在范圍，尤其在pH具有較好的緩沖能力，終濃度一般為mmol/L，培養(yǎng)液內(nèi)含mmol/LHEPES 即可達到較好的緩沖能力。Leagene HEPES緩沖鹽溶液(2×HeBS)是一種常用的細胞轉(zhuǎn)染溶液，主要由HEPES、氯化鈉、磷酸鹽等組成，其**適pH值為，經(jīng)過濾除菌處理。影響磷酸鈣轉(zhuǎn)染效率的因素主要有沉淀中DNA含量、DNA 在細胞上停留的時間、休克時間。Leagene 2xHeBS要求DNA濃度在為宜，Hela、BALB等細胞沉淀放置，CHO、DUKX、BⅡ等細胞可以通過甘油、DMSO進行熱休克處理以提高轉(zhuǎn)染效率。AVT穩(wěn)定供應(yīng)注射級海藻糖、蔗糖、TRIS/TRIS-HCl、HEPES等生物保護劑與緩沖鹽！

使用注射級氨丁三醇緩沖劑的注意事項：1.Tris緩沖液的pH值受溫度影響大，△pKa／℃＝－0.031，例如：4℃時緩沖液的pH＝8.4，則37℃時的pH＝7.4，所以一定要在使用溫度下進行配制，室溫下配制的Tris-HCl緩沖液不能用于0℃～4℃。2.Tris緩沖液的pH值受溶液濃度影響較大，緩沖液稀釋十倍，pH值的變化大于0.13.Tris在一定程度上與各種分子反應(yīng)，包括RNA酶抑制劑，醛，酶，DNA以及常見金屬如Cr3+，F(xiàn)e3+，Ni2+，Co2+和Cu2+等，在有些系統(tǒng)中會起抑制作用，在配制過程中需考慮與其他組分之間的相互作用；4.Tris緩沖液易吸收空氣中的CO2，配制的緩沖液要注意蓋嚴密封；5.Tris緩沖液對某些pH電極發(fā)生一定的干擾作用，需使用與注射級氨丁三醇溶液具有兼容性的電極；6.Tris緩沖液不適用于二喹啉甲酸（BCA）測定；7.吸入，攝入，皮膚吸收注射級氨丁三醇可造成傷害，操作時需戴好手套和護目鏡；8.作為蛋白緩沖液時，若后續(xù)工作需要質(zhì)譜，則不適宜用注射級氨丁三醇，比較好換成其他質(zhì)譜儀可耐受的緩沖液。國內(nèi)艾偉拓穩(wěn)定供貨注射級HEPES。安徽高純度HEPES現(xiàn)貨

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Tris-HCl緩沖液缺點：1、溫度效應(yīng)大，如4℃時pH=8.4，37℃時pH=7.42、pH值受溶液濃度影響較大，稀釋十倍，pH值的變化大于0.1；3、對某些pH電極發(fā)生一定的干擾作用，所以要使用與Tris溶液具有兼容性的電極。4、易吸收空氣中的CO2，所以配制的緩沖液要蓋嚴密封。HEPES緩沖液HEPES是一種非離子兩性緩沖液，其在pH7.2~7.4范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力，常用在生化診斷試劑盒、DNA/RNA提取試劑盒及PCR診斷試劑盒里。HEPES緩沖液優(yōu)點：pKa值介于6.0和8.0之間；在水中具有高溶解度；具有膜不透性，不易穿透生物膜；對生化反應(yīng)影響有限，可耐化學(xué)和酶解作用，且不與金屬離子生成復(fù)合物或沉淀；有極低的可見光和紫外光吸收；離子濃度、溶液組成和溫度對解離的影響小;HEPES緩沖液缺點：如果將HEPES水溶液暴露于環(huán)境光下三小時，會產(chǎn)生細胞毒性的H2O2；HEPES水溶液必須遠離光線以免影響實驗結(jié)果；而配置成溶劑后，要在4℃下保存，建議在短期內(nèi)使用效果更佳；HEPES粉末放置的時候一般放于干燥的室內(nèi)，不能直接長時間照射陽光。四川有登記號HEPES價格

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