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數(shù)字PCR實驗步驟包括：1）試劑配制：將10xdPCRBuffer、dPCR酶、引物和探針、無核酸酶水混合成dPCR預混液，并分裝到8聯(lián)排管中或96孔板中；將各待測樣本的核酸模板、陽性對照、陰性對照分別加入相應的8聯(lián)排管中或96孔板中；2）芯片進樣：在小海龜BioDigital·青全自動樣品處理系統(tǒng)上進行芯片上反應液進樣和液滴生成；3）芯片擴增：在小海龜BioDigital·青PCR擴增儀上進行芯片上PCR擴增反應；4）芯片閱讀：在小海龜BioDigital·青生物芯片閱讀儀上進行芯片上熒光信號閱讀；5）數(shù)據(jù)分析：使用生物芯片數(shù)據(jù)分析·青軟件進行數(shù)據(jù)分析和報告導出；dPCR儀器在操作中集成了前...

對于檢測需要高靈敏度以及技術確認的情況下，數(shù)字PCR技術也可以發(fā)揮重要作用。技術數(shù)據(jù)表明，數(shù)字PCR技術對的比較低檢測下限可到2copies/ml，比qPCR靈敏度提升了100倍。經測試，數(shù)字PCR在檢測和診斷的某些方面優(yōu)于金標準qPCR，尤其是在低病毒載量樣本中，相比起qPCR，數(shù)字PCR特異性、靈敏度、重現(xiàn)性和檢測限受影響更小。因此，未來預計數(shù)字PCR技術也將在類疾病中得到更加廣的應用。數(shù)字PCR的應用甚廣，除了可應用于進行突變的檢測以外，也可運用于基因擴增的檢測。通過數(shù)字PCR技術可建立多重熒光體系，用于同時檢測比如非小細胞肺中常見的MET和HER2耐藥擴增。有研究報道，使用數(shù)字PCR技...

作為時下的熱點技術，數(shù)字PCR是將核酸樣品分配到大量單獨、平行的微反應單元（nL，納升級別）中，使得每個反應單元中盡可能含有1個模板分子，并在此基礎上進行擴增、檢測和分布統(tǒng)計，從而實現(xiàn)靶標分子的比較 計數(shù)。（圖：數(shù)字PCR技術原理）根據(jù)微反應單元的不同形式，數(shù)字PCR產品可分為微板式、微滴式和芯片式等。目前，市場上主要的數(shù)字PCR產品主要是基于微滴式和芯片式，如Bio-Rad公司的QX200微滴式系統(tǒng)和ThermoFisher公司的QuantStudio系統(tǒng)等。與一、二代PCR技術相比，數(shù)字PCR具有很多優(yōu)勢：一是特異性、靈敏性均有顯著提高；二是在不依賴內參和標準曲線的前提下，可直接得到比較 ...

數(shù)字PCR系統(tǒng)的分散方式決定了分散數(shù)量，其結果基于統(tǒng)計的方法進行定量，增加反應單元數(shù)量（統(tǒng)計樣本量），可以增加其檢測的容量和動態(tài)檢測線性范圍達到和qPCR相近的動態(tài)范圍，同時減小一個反應單元中包含多個分子所造成的誤差，達到提高靈敏度和準確度。影響dPCR定量結果的因素包括：儀器采用的分散方式與數(shù)量、溶液稀釋方法、分散體積的準確性以及結果表達方式。分散方式與數(shù)量由數(shù)字PCR系統(tǒng)決定，分散體積和結果表達方式需要實驗人員在實驗過程中優(yōu)化得到。dPCR的測量結果通常表示為含量，即拷貝數(shù)轉基因質量百分比，而QPCR結果通常表示為拷貝數(shù)的質量分數(shù)。廣州全自動數(shù)字PCR品牌企業(yè)宗旨：成為數(shù)字PCR的，更好地...

數(shù)字PCR產品的發(fā)展，為不同場景下的多樣化核酸檢測需求提供了新的思路，尤其是在醫(yī)學檢驗方面，在 性疾病早期檢測、病癥的液體活檢、無創(chuàng)產前檢查等領域展現(xiàn)出良好的應用前景。實現(xiàn) 性疾病早期高效檢測——以病毒為例，有病毒檢測、和臨床樣本病毒載量評估He監(jiān)測環(huán)境病毒載量；二代熒光定量PCR檢測技術是目前病毒檢測的"金標準"，但由于病毒探針結合位點突變、樣本病毒載量不足等原因，在臨床檢測過程中經常出現(xiàn)假陰性結果，由于數(shù)字PCR具有更高的靈敏度、精細度，以及其適合痕量樣本檢測的特性，能夠檢測出熒光定量PCR檢測過程中錯過的 ，可作為后者的補充。在人群篩查及臨床診療中，為科學選取采樣...

數(shù)字聚合酶鏈式反應（digitalpolymerchainreaction，dPCR）技術因具有高靈敏度、受基質干擾少等優(yōu)勢而被廣用于轉基因食品檢測。本研究綜述了數(shù)字PCR技術的原理、系統(tǒng)各部件的優(yōu)劣勢，梳理了數(shù)字PCR技術在轉基因檢測與溯源技術（標準物質）方面的進展和發(fā)展趨勢，以期為轉基因食品檢測領域提供參考依據(jù)。dPCR的擴增過程大致上可以分為3步：樣品的分散、樣品的熱循環(huán)擴增和樣品的檢測。對于數(shù)字PCR儀器系統(tǒng)，各個部件之間仍然有較大的改進空間，要發(fā)揮部件之間的協(xié)同作用是很重要的，而且有持續(xù)研究的價值。表1中總結了部分常見的數(shù)字PCR系統(tǒng)的類型，以及相對在硬件、便攜性、性價比和自動化程度...

PCR（PolymeraseChainReaction）技術，即聚合酶連反應，是一種擴大和復制目的片段DNA的技術，其發(fā)現(xiàn)對于生命科學的發(fā)展具有重要的意義。而3D數(shù)字PCR到底是什么鬼？它其實是出現(xiàn)的一款PCR儀，其具有對目的DNA分子做出定量的優(yōu)點，進而提供的準確性、靈敏度。應用該技術，實現(xiàn)對DNA進行精確定量，精確度可通過復制次數(shù)實現(xiàn)。通過準確性的進行定量檢測基因，有助于臨床上在、病毒等疾病作參考。同時，其具有高通量，檢測速度快，成本相對低等優(yōu)點，為后期精細奠定基礎。dPCR的結果統(tǒng)計方式有2種，一種是采用標記多種顏色，另一種采用概率統(tǒng)計的數(shù)據(jù)處理方法。上海微滴式數(shù)字PCR儀器常規(guī)PCR和...

微滴數(shù)字PCR主要是將兩種互不相溶的液體，以其中一種作為連續(xù)相（油），另一種作為分散相（水），在水/油兩相表面張力和剪切共同作用下分散相以微小體積單元的形式存在于連續(xù)中，從而成液滴。這種液滴式的反應腔室具有體積小、樣品間無擴散等優(yōu)勢。在ddPCR中，利用微滴發(fā)生器可以一次生成數(shù)萬乃至百萬個納升甚至皮升級別的單個油包水微滴，作為數(shù)字PCR的樣品分散載體。這里，液滴中包裹了單拷貝DNA模板和PCR反應液，然后將液滴收集在PCR反應管中進行擴增。?PCR反應結束后檢測每個微滴的熒光信號。目前Bio-Rad公司的QX100系統(tǒng)、QX200系統(tǒng)均為采用液滴技術的數(shù)字PCR系統(tǒng)。圖6.Bio-Rad的液滴...

數(shù)字PCR實驗步驟包括：1）試劑配制：將10xdPCRBuffer、dPCR酶、引物和探針、無核酸酶水混合成dPCR預混液，并分裝到8聯(lián)排管中或96孔板中；將各待測樣本的核酸模板、陽性對照、陰性對照分別加入相應的8聯(lián)排管中或96孔板中；2）芯片進樣：在小海龜BioDigital·青全自動樣品處理系統(tǒng)上進行芯片上反應液進樣和液滴生成；3）芯片擴增：在小海龜BioDigital·青PCR擴增儀上進行芯片上PCR擴增反應；4）芯片閱讀：在小海龜BioDigital·青生物芯片閱讀儀上進行芯片上熒光信號閱讀；5）數(shù)據(jù)分析：使用生物芯片數(shù)據(jù)分析·青軟件進行數(shù)據(jù)分析和報告導出；在使用dPCR進行轉基因檢測...

20世紀末，Vogelstein等提出數(shù)字PCR(digitalPCR，dPCR)的概念，通過將一個樣本分成幾十到幾萬份，分配到不同的反應單元，每個單元至少包含一個拷貝的目標分子(DNA模板)，在每個反應單元中分別對目標分子進行PCR擴增，擴增結束后對各個反應單元的熒光信號進行統(tǒng)計學分析。PCR實際上是一個在模板DNA、引物(模板片段兩端的已知序列)和四種脫氧核苷酸等存在的情況下，DNA聚合酶依賴的酶促合成反應，擴增的特異性取決于引物與模板DNA的特異結合。在數(shù)字PCR賽道，塔歌生物將加速胎兒染色體非整倍體無創(chuàng)產前篩查注冊證的申報。法國數(shù)字PCR常規(guī)PCR和實時熒光PCR定量檢測都需要已知拷貝...

企業(yè)宗旨：成為數(shù)字PCR的，更好地服務于體外診斷行業(yè)，讓檢測更簡單！企業(yè)價值觀：用戶，質量為本；潛力而為，主動開拓；高效執(zhí)行，負責到底。發(fā)展歷程：2016年，企業(yè)成立2017年，數(shù)字PCR系統(tǒng)研制成功2018年，產品線成熟2019年，生產線建成“讓檢測，更簡單”。臻準生物誠摯邀請您蒞臨展會現(xiàn)場，洽談合作、共贏未來！作為華南地區(qū)備受舉薦的專業(yè)平臺，BTE始終以昂首積極的姿態(tài)迎接數(shù)萬專業(yè)人士，攜手生物技術行業(yè)從業(yè)者共同探討行業(yè)發(fā)展新機遇。多年來，BTE始終時刻探索業(yè)界風向，吸納行業(yè)前沿資源，不忘宗旨，銳意開拓，正圍繞粵港澳大灣區(qū)生物行業(yè)產業(yè)群的協(xié)同發(fā)展交流與融合打造一個高水平科技創(chuàng)新載體和平臺。數(shù)...

在定量PCR時，我們常常糾結一個問題，究竟是相對定量還是***定量呢？如今，你無需糾結了，因為數(shù)字PCR（digitalPCR）來了。盡管這兩種技術有些類似，都是估計起始樣品中的核酸量，但它們有一個重要的區(qū)別。定量PCR是依靠標準曲線或參照基因來測定核酸量，而數(shù)字PCR則讓你能夠直接數(shù)出DNA分子的個數(shù)，是對起始樣品的***定量。因此特別適用于依靠Ct值不能很好分辨的應用領域：拷貝數(shù)變異、突變檢測、基因相對表達研究（如等位基因不平衡表達）、二代測序結果驗證、miRNA表達分析、單細胞基因表達分析等。數(shù)字PCR是定量技術，基于單分子PCR方法來進行計數(shù)的核酸定量，是一種定量的方法。美國微滴式數(shù)字...

數(shù)字PCR的引物和探針設計規(guī)則同熒光定量PCR是類似的，具體規(guī)則如下：1、查找和選擇目標序列設計引物和探針的第一步是得到感興趣基因的核酸序列。找到基因保守區(qū)域：基因的保守區(qū)域是指來自同一屬/種/亞型的、在某個基因上堿基序列差別很小或沒有差別的區(qū)域。根據(jù)需要，使用ClustalX或ClustalW等軟件對齊屬于同一屬/種/亞型的基因的一組序列，在對齊序列的保守區(qū)域設計引物，并確保引物結合位點處的保守序列與其它非待檢測的屬/種/亞型的堿基序列具有較大的差異。擴增產物長度（AmpliconLength）：可在75-200bp之間（產物長度=下游引物位置-上游引物位置+1）。數(shù)字PCR是通過將一個樣本...

由于現(xiàn)有的商業(yè)化數(shù)字PCR設備在物理上只設置了2個檢測通道，所以存在一個明顯的短板：不能同時進行多個位點的檢測。在樣品多位點的檢測中，就需要更多的起始樣品，但臨床上組織的樣品非常有限。相比之下熒光定量PCR儀上就很容易實現(xiàn)多重檢測。為了考察利用數(shù)字PCR實現(xiàn)多重檢測的可能性，英國TheInstituteofCancerResearch的研究人員以非小細胞肺相關的KRAS基因為檢測對象，在Bio-Rad的數(shù)字PCR系統(tǒng)上通過3個三重ddPCR檢測體系來實現(xiàn)9個KRAS突變位點的檢測。20世紀末，Bert Vogelstein等提出數(shù)字PCR的概念。法國全自動多重數(shù)字PCR試劑盒引物設計（Desi...

在PCR進行的過程中，首先是引物和探針分別結合，然后開始擴增。如果一個微滴當中有目標基因的片段，Taqman探針就會被酶切碎，熒光基團和淬滅基團分離。在后面的檢測過程中，熒光基團被激發(fā)光路激發(fā)之后就會發(fā)熒光。如果沒有，Taqman探針就不會被切碎，在后面的檢測過程中，熒光基團吸收到激發(fā)光的能量，就會被淬滅基團給淬滅，那么儀器就檢測不到這個微滴的信號。檢測的過程中，并不是說一個樣本中檢測到了幾個亮點，這個反應當中就有幾個目標基因的拷貝。因為目標基因的片段，在微滴當中的分布，是符合泊松分布的（也就是說進不進的概率相等，并且相互獨立）。所以，一個發(fā)光的微滴中，可能有一個或者三個四個，甚至更多個目標基...

本次推出的全自動數(shù)字PCR一體機可以適用于包括醫(yī)療檢測領域在內的多種應用場景。對于可以實現(xiàn)早期篩查、早期診斷、用藥指導以及監(jiān)測的復發(fā)。對于病原體可以實現(xiàn)超多重檢測，以利于快速診斷。在優(yōu)生優(yōu)育領域也可以實現(xiàn)更多遺傳性疾病的診斷和檢測。對于臨床應用具有極大的潛力和價值。通過線上+線下的方式舉行了數(shù)字PCR2.0技術方案研討會，來自醫(yī)療界的**學者共聚一堂，圍繞PCR技術的發(fā)展和應用進行交流和討論。歡迎咨詢廣州雙螺旋科學儀器有限公司。dPCR在轉基因檢測方面的應用仍處于研究和探索的階段。廣州雙螺旋生物儀器數(shù)字PCR樣品回收數(shù)字PCR技術是繼一代普通PCR、二代熒光定量PCR之后的第三代PCR技術。該...

3D數(shù)字PCR為液體活檢提供技術支持液體活檢是一種非侵入性的檢測基因及臨床效果的一種方法，目前可能正在開展有關3D數(shù)字PCR在在液體活檢中的療效，為后期臨床提供更多可靠的指導作用。報道稱“無創(chuàng)傷性肺檢測技術即將登陸中國”。隨著基因檢測技術，如類似3D數(shù)字PCR技術的發(fā)展，推動我們將進入了“DNA的應用商城”這樣的新時代，如23andme、華大基因等專業(yè)的檢測服務機構，提供更加專業(yè)的基因檢測結果，經基因報告解讀師或遺傳咨詢師進行通俗的解讀，讓我們每一個人都能夠了解自己的基因，擁有自己的“生命之書”，讓我們更加健康的生活。精細醫(yī)療其實本質是應用生物學信息與大數(shù)據(jù)科學的交叉發(fā)展的新型醫(yī)學概念與醫(yī)療模...

數(shù)字PCR技術的出現(xiàn)不是為了完全取代原有分子診斷技術，而是更好的補充和完善現(xiàn)有技術平臺。數(shù)字PCR為不同應用場景下的多樣化核酸檢測需求提供了新的思路，尤其是在臨床檢測方面。國產數(shù)字PCR企業(yè)在商業(yè)化應用方面，也不斷“攻城略地”。數(shù)字PCR作為當下靈敏的核酸檢測技術，盡管目前國產數(shù)字PCR企業(yè)異軍突起，在臨床市場中實現(xiàn)了彎道超車，但未來仍然需要聚焦客戶需求，不斷夯實底層創(chuàng)新，同時在檢測成本、自動化、試劑盒申報注冊、出海國際化等方面不斷努力，提供更為的解決方案。國際局勢，波譎云詭。在百年未有之大變局，實現(xiàn)中華民族的偉大復興，需要國內企業(yè)瞄準技術高地，以爭分奪秒的精神，解決技術"卡脖子"的難題，不斷...

企業(yè)宗旨：成為數(shù)字PCR的，更好地服務于體外診斷行業(yè)，讓檢測更簡單！企業(yè)價值觀：用戶，質量為本；潛力而為，主動開拓；高效執(zhí)行，負責到底。發(fā)展歷程：2016年，企業(yè)成立2017年，數(shù)字PCR系統(tǒng)研制成功2018年，產品線成熟2019年，生產線建成“讓檢測，更簡單”。臻準生物誠摯邀請您蒞臨展會現(xiàn)場，洽談合作、共贏未來！作為華南地區(qū)備受舉薦的專業(yè)平臺，BTE始終以昂首積極的姿態(tài)迎接數(shù)萬專業(yè)人士，攜手生物技術行業(yè)從業(yè)者共同探討行業(yè)發(fā)展新機遇。多年來，BTE始終時刻探索業(yè)界風向，吸納行業(yè)前沿資源，不忘宗旨，銳意開拓，正圍繞粵港澳大灣區(qū)生物行業(yè)產業(yè)群的協(xié)同發(fā)展交流與融合打造一個高水平科技創(chuàng)新載體和平臺。通...

數(shù)字PCR實驗步驟包括：1）試劑配制：將10xdPCRBuffer、dPCR酶、引物和探針、無核酸酶水混合成dPCR預混液，并分裝到8聯(lián)排管中或96孔板中；將各待測樣本的核酸模板、陽性對照、陰性對照分別加入相應的8聯(lián)排管中或96孔板中；2）芯片進樣：在小海龜BioDigital·青全自動樣品處理系統(tǒng)上進行芯片上反應液進樣和液滴生成；3）芯片擴增：在小海龜BioDigital·青PCR擴增儀上進行芯片上PCR擴增反應；4）芯片閱讀：在小海龜BioDigital·青生物芯片閱讀儀上進行芯片上熒光信號閱讀；5）數(shù)據(jù)分析：使用生物芯片數(shù)據(jù)分析·青軟件進行數(shù)據(jù)分析和報告導出；Drop-off數(shù)字PCR檢...

全自動樣本制備系統(tǒng)DMX-1000配備氣流發(fā)生裝置和氣壓控制裝置，能夠實現(xiàn)高精度壓力控制，結合**產品液滴生成芯片和微流控乳液滴生成技術，DMX-1000可以在70秒內快速、穩(wěn)定、高效地生成大小均一的微乳液滴。微滴數(shù)量可達2萬-60萬個，粒徑范圍30-120μm，性能穩(wěn)定。除此之外，銳訊還提供微流控芯片的定制服務，以滿足不同的液滴數(shù)目和尺寸要求。平板式快速擴增儀TC-1000，不再使用傳統(tǒng)的96孔板，而是特制的液滴擴增芯片；不再是傳統(tǒng)的“燒開水”加熱模式，代之以平板式單液滴層均勻受熱的方式。在這樣的改進之下，TC-1000完成40個PCR循環(huán)只需約45分鐘（TC-2.0升級版更是把時間縮短到了...

相比于qPCR，dPCR在轉基因檢測中具有以下優(yōu)勢：（1）檢測靈敏度高：理論上dPCR的靈敏度可達1個拷貝，而實際應用中dPCR的小檢出限和比較低定量限數(shù)值非常接近，所以dPCR可以在非常低的目標拷貝數(shù)下得到精確的結果；通常轉基因比參考基因（內源基因）濃度低很多；（2）前處理簡單且受基質成分干擾較小：dPCR反應效率和精密度受到食品基質成分干擾影響較小，可應用于混合基質樣品中低豐度DNA的檢測；（3）dPCR對抑制劑的敏感性較低：由于dPCR結果表示為“有熒光“或“無熒光”，即使存在抑制劑降低了熒光強度仍可以表示為“有熒光；（4）適合多重轉基因檢測：食品或飼料提取的DNA中可能包含多種轉基因片...

根據(jù)泊松分布的定義和適用條件可知，如果我們設微液滴總數(shù)為N，投入的靶序列拷貝數(shù)為M，那么“每個微液滴中的靶序列拷貝數(shù)”的概率分布是近似滿足泊松分布的。理解之前，首先要明確一點，在檢測的過程中，并不是說一個樣本中檢測到了幾個亮點，這個反應當中就有幾個目標基因的拷貝。因為目標基因的片段，在微滴當中的分布，是符合泊松分布的（也就是說進不進的概率相等，并且相互獨立）。所以，一個發(fā)光的微滴中，可能有一個或者三個四個，甚至更多個目標基因的拷貝。因此，發(fā)光的微滴數(shù)與原始的基因拷貝數(shù)并不是一對一的對應關系。dPCR可直接溯源SI國際單位制摩爾，適合單一、雙重及多重轉基因標準物質研究，一次可識別不同的轉基因區(qū)域...

PCR常使用目標序列的拷貝數(shù)或某一給定樣品中轉基因的百分比來體現(xiàn)方法靈敏度。由于qPCR和dPCR實驗過程所用試劑的兼容性較好，在使用dPCR進行轉基因檢測時，通常直接參照qPCR的方法。使用不同技術對相同樣品檢測時，兩種方法的靈敏度是否具有可比性成為關注的問題。Burns等21]使用Fluidigm公司的12.765（12板，每板765個微單元）芯片數(shù)字PCR分析儀測定標準物質ERM-AD413檢測轉基因玉米MON810。該小組應用dPCR技術評估在qPCR定義下的靈敏度數(shù)值，在拷貝數(shù)200-700之間，dPCR與qPCR的測量結果具有一致性。但與qPCR的靈敏度相比，dPCR在低于拷貝數(shù)2...

企業(yè)宗旨：成為數(shù)字PCR的，更好地服務于體外診斷行業(yè)，讓檢測更簡單！企業(yè)價值觀：用戶，質量為本；潛力而為，主動開拓；高效執(zhí)行，負責到底。發(fā)展歷程：2016年，企業(yè)成立2017年，數(shù)字PCR系統(tǒng)研制成功2018年，產品線成熟2019年，生產線建成“讓檢測，更簡單”。臻準生物誠摯邀請您蒞臨展會現(xiàn)場，洽談合作、共贏未來！作為華南地區(qū)備受舉薦的專業(yè)平臺，BTE始終以昂首積極的姿態(tài)迎接數(shù)萬專業(yè)人士，攜手生物技術行業(yè)從業(yè)者共同探討行業(yè)發(fā)展新機遇。多年來，BTE始終時刻探索業(yè)界風向，吸納行業(yè)前沿資源，不忘宗旨，銳意開拓，正圍繞粵港澳大灣區(qū)生物行業(yè)產業(yè)群的協(xié)同發(fā)展交流與融合打造一個高水平科技創(chuàng)新載體和平臺。無...

相比于qPCR，dPCR在轉基因檢測中具有以下優(yōu)勢：（1）檢測靈敏度高：理論上dPCR的靈敏度可達1個拷貝，而實際應用中dPCR的小檢出限和比較低定量限數(shù)值非常接近，所以dPCR可以在非常低的目標拷貝數(shù)下得到精確的結果；通常轉基因比參考基因（內源基因）濃度低很多；（2）前處理簡單且受基質成分干擾較?。篸PCR反應效率和精密度受到食品基質成分干擾影響較小，可應用于混合基質樣品中低豐度DNA的檢測；（3）dPCR對抑制劑的敏感性較低：由于dPCR結果表示為“有熒光“或“無熒光”，即使存在抑制劑降低了熒光強度仍可以表示為“有熒光；（4）適合多重轉基因檢測：食品或飼料提取的DNA中可能包含多種轉基因片...

PCR已成為分子診斷領域重要的技術手段之一，占據(jù)分子診斷市場的半壁江山。數(shù)字PCR是一代PCR技術，也是當前靈敏度和定量精度比較高的分子檢測技術。但數(shù)字PCR使用成本仍然相對較高，檢測靶點數(shù)少（一般≤6靶點/反應），阻礙了其在臨床中的大規(guī)模應用，提高數(shù)字PCR的多重檢測能力迫在眉睫?；跓晒馔ǖ罃?shù)的增加和基于探針濃度梯度增加，均可以在一定程度上提高數(shù)字PCR檢測重數(shù)，然而只能達到"線性"增加的目的?；谔结槤舛忍荻鹊亩嘀貦z測技術雖然光'f明顯增加多重能力，但由于無法避免交叉反應現(xiàn)象，不能確保獲得位點特異性的分簇，因此穩(wěn)定性不足、靈敏度較差，難以滿足臨床級別的數(shù)據(jù)要求。而基于創(chuàng)新的且數(shù)字PCR...

數(shù)字PCR系統(tǒng)的分散方式決定了分散數(shù)量，其結果基于統(tǒng)計的方法進行定量，增加反應單元數(shù)量（統(tǒng)計樣本量），可以增加其檢測的容量和動態(tài)檢測線性范圍達到和qPCR相近的動態(tài)范圍，同時減小一個反應單元中包含多個分子所造成的誤差，達到提高靈敏度和準確度。影響dPCR定量結果的因素包括：儀器采用的分散方式與數(shù)量、溶液稀釋方法、分散體積的準確性以及結果表達方式。分散方式與數(shù)量由數(shù)字PCR系統(tǒng)決定，分散體積和結果表達方式需要實驗人員在實驗過程中優(yōu)化得到。dPCR的測量結果通常表示為含量，即拷貝數(shù)轉基因質量百分比，而QPCR結果通常表示為拷貝數(shù)的質量分數(shù)。臻準數(shù)字PCR試劑盒在精細診療領域，患者外周血中的循環(huán)DN...

20世紀末，Vogelstein等提出數(shù)字PCR(digitalPCR，dPCR)的概念，通過將一個樣本分成幾十到幾萬份，分配到不同的反應單元，每個單元至少包含一個拷貝的目標分子(DNA模板)，在每個反應單元中分別對目標分子進行PCR擴增，擴增結束后對各個反應單元的熒光信號進行統(tǒng)計學分析。PCR實際上是一個在模板DNA、引物(模板片段兩端的已知序列)和四種脫氧核苷酸等存在的情況下，DNA聚合酶依賴的酶促合成反應，擴增的特異性取決于引物與模板DNA的特異結合。在數(shù)字PCR賽道，塔歌生物將加速胎兒染色體非整倍體無創(chuàng)產前篩查注冊證的申報。上海賽默飛數(shù)字PCR技術數(shù)字PCR技術的出現(xiàn)不是為了完全取代原...

在精細診療領域，患者外周血中的循環(huán)DNA（ctDNA），在的早期篩查，圍術期監(jiān)測，藥物療效評估，預后等方面具有重要的臨床應用價值。在肺液體活檢領域，EGFR突變由于其在東亞人群中的高突變率,實現(xiàn)精細檢測顯得尤為重要。研究表明，相較于熒光定量PCR，數(shù)字PCR對于血液ctDNA的檢測靈敏度更高（0.01%），EGFR突變的陽性檢出率也更高。在患者術后復發(fā)檢測中，數(shù)字PCR評估出的ctDNA陽性，可以早于影像學數(shù)月提前揭示出患者復發(fā)。因此，該項技術在肺精細診療中具有重要的作用。20世紀末，Bert Vogelstein等提出數(shù)字PCR的概念。華南地區(qū)雙螺旋生物儀器數(shù)字PCR系統(tǒng)在定量PCR時，我們...