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外泌體的提取分離的方法：1、超速離心法（差速離心）：超離法是較常用的外泌體純化手段，采用低速離心、高速離心交替進(jìn)行，可分離到大小相近的囊泡顆粒。超離法因操作簡單，獲得的囊泡數(shù)量較多而廣受歡迎，但過程比較費(fèi)時(shí)，且回收率不穩(wěn)定（可能與轉(zhuǎn)子類型有關(guān)），純度也受到質(zhì)疑...

外泌體的臨床應(yīng)用：間充質(zhì)干細(xì)胞是目前較普遍使用的細(xì)胞類型，它具有自我更新，多向分化、分泌細(xì)胞因子和細(xì)胞外囊泡體、免疫調(diào)節(jié)、來源普遍等特點(diǎn)，在流感病毒的臨床診療中取得了良好的成果。間充質(zhì)干細(xì)胞來源外泌體與間充質(zhì)干細(xì)胞有著相似的功能，包括修復(fù)與再生組織、阻止炎癥反...

外泌體遞送藥物的優(yōu)勢：許多新的候選藥物（例如蛋白質(zhì)和核酸）在體內(nèi)環(huán)境中高度不穩(wěn)定，對診療結(jié)果的效果提出了重大挑戰(zhàn)。鑒于與許多當(dāng)前的納米微粒遞送系統(tǒng)相關(guān)的問題，外泌體作為“自然的遞送系統(tǒng)”允許遞送這些生物分子。由于外泌體體積小和其本身就是細(xì)胞產(chǎn)物，通過外泌體遞送...

外泌體病毒傳染：外泌體可以限制或促進(jìn)病毒傳染。如IFNα或APOBEC3G等外泌體載體可通過限制病毒復(fù)制或增強(qiáng)抗病毒免疫來阻止傳染。病毒也可以劫持外泌體的生物發(fā)生機(jī)制來促進(jìn)病毒的傳播。外泌體可以作為一個(gè)假包膜，通過四聚體蛋白(CD81,CD9)和PtSer相互...

外泌體與免疫反應(yīng)、病毒致病性、妊娠、心血管疾病、中樞的神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)疾病和病癥進(jìn)展相關(guān)。由外泌體傳遞到受體細(xì)胞的蛋白質(zhì)、代謝物和核酸有效地改變了它們的生物反應(yīng)。這種外泌體介導(dǎo)的反應(yīng)可以促進(jìn)或阻止疾病。外泌體在調(diào)節(jié)復(fù)雜的細(xì)胞內(nèi)通路方面的固有特性使其在許多疾病的診療...

外泌體為細(xì)胞療法中的不同合成分子和生物分子的遞送提供了廣闊的前景和嶄新的診療領(lǐng)域。外泌體還顯示出了在診療各種疾?。ㄈ缧募〔『蜕窠?jīng)?。┓矫娴臐摿?。但是，在實(shí)際應(yīng)用外泌體之前，需要使用大型動物模型進(jìn)行進(jìn)一步研究和臨床試驗(yàn)。同時(shí)需要開發(fā)大規(guī)模生產(chǎn)質(zhì)量可控的外泌體并快...

胞外囊泡和外泌體的異質(zhì)性。細(xì)胞外囊泡的兩大類是胞外體和外泌體。胞外體通過質(zhì)膜出芽釋放，大小在50~1mm之間。外泌體起源于內(nèi)泌體途徑，通過形成包含ILVs的ESEs、LSEs，較終形成多泡體。當(dāng)MVBs與質(zhì)膜融合時(shí)，外泌體釋放(尺寸范圍~40~160nm)。外...

外泌體是分泌的細(xì)胞外囊泡的主要群體，是具有生物活性的脂雙層囊泡，大小約為30-100nm，由不同類型的正常細(xì)胞和瘤子細(xì)胞自然產(chǎn)生和釋放。這些囊泡在細(xì)胞間通訊中起重要作用，并影響細(xì)胞外環(huán)境和免疫系統(tǒng)反應(yīng)。外泌體通過內(nèi)體途徑分泌到細(xì)胞外空間，并將各種生物活性分子（...

尺寸排阻色譜法（SEC）根據(jù)大小來分離樣本。該技術(shù)應(yīng)用了一個(gè)裝有多孔聚合物珠的色譜柱，該聚合物珠包含多個(gè)孔和通道，分子根據(jù)其直徑穿過。半徑小的分子穿過柱子的孔遷移需要較長的時(shí)間，而大分子則較早地從柱子上洗脫下來。SEC可精確分離大分子和小分子。與離心分離方法相...

外泌體中常見的細(xì)胞質(zhì)蛋白是Rabs蛋白，是鳥苷酸三磷酸酶家族的一種。它可以調(diào)節(jié)外泌體膜與受體細(xì)胞的融合，有文獻(xiàn)報(bào)道稱RAB4,RAB5和RAB11主要出現(xiàn)在早期以及回收的核內(nèi)體中，RAB7和RAB9主要出現(xiàn)在晚期的核內(nèi)體。現(xiàn)有大量的研究發(fā)現(xiàn)外泌體中含有40種R...

外泌體是包含了復(fù)雜RNA和蛋白質(zhì)的小膜泡(30–150nm)，由所有體外和體內(nèi)細(xì)胞持續(xù)分泌。由于人體內(nèi)復(fù)雜的功能，包括細(xì)胞間通訊和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，外泌體正在改變研究。這些細(xì)胞外囊泡正在生長，這既是為了了解其生物學(xué)功能，也是為了將其用于實(shí)際應(yīng)用，如無創(chuàng)診斷和高級調(diào)理開...

細(xì)胞外小泡通過充當(dāng)脂肪組織、肝臟、骨骼肌和免疫細(xì)胞之間的細(xì)胞間通訊方式，在肥胖及其代謝并發(fā)癥的發(fā)展中發(fā)揮作用。外泌體可能在外周胰島素敏感性的調(diào)節(jié)中起作用，外周胰島素敏感性是T2D發(fā)病機(jī)理的主要組成部分。外泌體似乎通過至少兩種不同的機(jī)制來調(diào)節(jié)胰島素敏感性，即通過...

外泌體病毒傳染：外泌體可以限制或促進(jìn)病毒傳染。如IFNα或APOBEC3G等外泌體載體可通過限制病毒復(fù)制或增強(qiáng)抗病毒免疫來阻止傳染。病毒也可以劫持外泌體的生物發(fā)生機(jī)制來促進(jìn)病毒的傳播。外泌體可以作為一個(gè)假包膜，通過四聚體蛋白(CD81,CD9)和PtSer相互...

NTA技術(shù)已被作為外泌體表征手段之一，相較于其他表征方式NTA技術(shù)的樣本處理更簡單、更能保證外泌體原始狀態(tài)、檢測速度更快。大致方法是：將分離的外泌體樣本注入納米顆粒追蹤分析儀，用激光光束穿過樣本，激光在腔室內(nèi)與顆粒相互作用時(shí)會發(fā)生散射，通過裝有攝像頭的顯微鏡收...

質(zhì)膜的連續(xù)內(nèi)陷較終導(dǎo)致多泡體的形成，多泡體可與細(xì)胞內(nèi)的其他囊泡和細(xì)胞器交叉，從而增加了外泌體成分的多樣性。根據(jù)細(xì)胞來源的不同，細(xì)胞外囊泡，包括外泌體，可以包含細(xì)胞的許多成分，包括DNA、RNA、脂質(zhì)、代謝物、胞質(zhì)和細(xì)胞表面蛋白。目前產(chǎn)生外泌體的生理目的尚不清楚...

外泌體研究背景：胞外囊泡是從細(xì)胞膜上脫落或者由細(xì)胞分泌的具有雙層膜結(jié)構(gòu)的囊泡狀小體，主要由微囊泡、凋亡小體、外泌體組成。而外泌體是其中一類小囊泡，直徑為30~150nm，密度1.10~1.18g/ml，可攜帶核酸、蛋白質(zhì)質(zhì)和脂質(zhì)等，存在于血液、唾液、尿液等多種...

外泌體分離的主要挑戰(zhàn)之一是消除納米級污染物，包括干擾外泌體標(biāo)志物解析的游離核酸和脂蛋白。超速離心是目前分離外泌體的主要技術(shù)。盡管如此，它仍難以符合臨床應(yīng)用所需的標(biāo)準(zhǔn)，主要是由于該方法得到的外泌體純度不足，產(chǎn)量較低，完整性欠佳且分離純化操作耗時(shí)長。其他方法，例如...

尺寸排阻色譜法（SEC）根據(jù)大小來分離樣本。該技術(shù)應(yīng)用了一個(gè)裝有多孔聚合物珠的色譜柱，該聚合物珠包含多個(gè)孔和通道，分子根據(jù)其直徑穿過。半徑小的分子穿過柱子的孔遷移需要較長的時(shí)間，而大分子則較早地從柱子上洗脫下來。SEC可精確分離大分子和小分子。與離心分離方法相...

外泌體研究背景：胞外囊泡是從細(xì)胞膜上脫落或者由細(xì)胞分泌的具有雙層膜結(jié)構(gòu)的囊泡狀小體，主要由微囊泡、凋亡小體、外泌體組成。而外泌體是其中一類小囊泡，直徑為30~150nm，密度1.10~1.18g/ml，可攜帶核酸、蛋白質(zhì)質(zhì)和脂質(zhì)等，存在于血液、唾液、尿液等多種...

外泌體中常見的細(xì)胞質(zhì)蛋白是Rabs蛋白，是鳥苷酸三磷酸酶家族的一種。它可以調(diào)節(jié)外泌體膜與受體細(xì)胞的融合，有文獻(xiàn)報(bào)道稱RAB4,RAB5和RAB11主要出現(xiàn)在早期以及回收的核內(nèi)體中，RAB7和RAB9主要出現(xiàn)在晚期的核內(nèi)體。現(xiàn)有大量的研究發(fā)現(xiàn)外泌體中含有40種R...

外泌體遞送藥物的優(yōu)勢：許多新的候選藥物（例如蛋白質(zhì)和核酸）在體內(nèi)環(huán)境中高度不穩(wěn)定，對診療結(jié)果的效果提出了重大挑戰(zhàn)。鑒于與許多當(dāng)前的納米微粒遞送系統(tǒng)相關(guān)的問題，外泌體作為“自然的遞送系統(tǒng)”允許遞送這些生物分子。由于外泌體體積小和其本身就是細(xì)胞產(chǎn)物，通過外泌體遞送...

流式細(xì)胞技術(shù)是細(xì)胞和小顆粒定性和定量表征的有效方法，其用于外泌體定量檢測的準(zhǔn)確性也在不斷上升。將外泌體表面特異性標(biāo)志物CD63、CD81等相應(yīng)抗體進(jìn)行標(biāo)記，可用流式細(xì)胞儀檢測到陽性表達(dá)，從而實(shí)現(xiàn)對外泌體的定量。但流式細(xì)胞技術(shù)檢測時(shí)需要單顆粒懸浮液，當(dāng)外泌體濃度...

磁珠免疫法分離外泌體：將針對目的抗原的抗體通過生物素-鏈霉親和素連接到磁珠表面，然后將磁珠與樣品共孵育，使外泌體特異性結(jié)合到磁珠上形成磁珠-外泌體復(fù)合物，再用蒸餾水或者PBS沖洗，結(jié)尾用甘氨酸-Tris-HCl溶液洗脫獲得外泌體。該方法相對于ELISA的好處主...

外泌體作為細(xì)胞間信使較早發(fā)現(xiàn)于體外培養(yǎng)的綿羊紅細(xì)胞上清液中，是直徑為30~150nm，密度為1.10~1.18g/ml的細(xì)胞外囊泡，攜帶豐富的遺傳信息，參與細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞遷移、瘤子新生血管生長和瘤子微環(huán)境形成等過程。由于現(xiàn)存的分離技術(shù)是基于外泌體的大小、結(jié)...

外泌體的納米球膜型結(jié)構(gòu)由雙層脂質(zhì)形成。它也由各種類型的脂質(zhì)和蛋白質(zhì)組成，這些脂質(zhì)和蛋白質(zhì)衍生自形成外泌體的親代細(xì)胞。根據(jù)外泌體數(shù)據(jù)庫ExoCarta的資料，目前已知約有8000種蛋白質(zhì)和194種脂質(zhì)與外泌體相關(guān)。外泌體通過生物體液被多種不同類型的細(xì)胞分泌，包括...

外泌體生物學(xué)功能：1、在心血管系統(tǒng)中，據(jù)報(bào)道，源自人胚胎干細(xì)胞（ESC）的間充質(zhì)干細(xì)胞（MSC）外泌體可減少小鼠和豬模型中的心肌缺血和再灌注損傷；2、在免疫系統(tǒng)中，據(jù)報(bào)道趨化因子受體CCR5通過外泌體在細(xì)胞之間轉(zhuǎn)移是細(xì)胞人類免疫缺陷病毒傳染的一種機(jī)制；3、在中...

外泌體分離的主要挑戰(zhàn)之一是消除納米級污染物，包括干擾外泌體標(biāo)志物解析的游離核酸和脂蛋白。超速離心是目前分離外泌體的主要技術(shù)。盡管如此，它仍難以符合臨床應(yīng)用所需的標(biāo)準(zhǔn)，主要是由于該方法得到的外泌體純度不足，產(chǎn)量較低，完整性欠佳且分離純化操作耗時(shí)長。其他方法，例如...

外泌體的脂質(zhì)和蛋白質(zhì)組成可以影響它們的藥代動力學(xué)特性，它們的天然成分可能在提高生物利用度和減少不良反應(yīng)方面發(fā)揮作用。除了它們的診療潛力，外泌體也有幫助疾病診斷的潛力。它們已經(jīng)在所有的生物液體中被報(bào)道，并且通過生物液體取樣(液體活組織檢查)可以比較容易地獲得外泌...

內(nèi)化的外泌體和內(nèi)源性產(chǎn)生的外泌體的細(xì)胞旅程：外泌體可以通過不同的機(jī)制直接進(jìn)入細(xì)胞。外泌體由細(xì)胞通過內(nèi)吞作用過程從頭生成。外泌體不斷地被細(xì)胞產(chǎn)生和吸收。它們可能是新生成的外泌體和消耗的外泌體的混合物。目前尚不清楚內(nèi)生性產(chǎn)生或消耗的外泌體是一起釋放還是單獨(dú)釋放。被...

細(xì)胞外囊泡是蛋白質(zhì)、mRNA、miRNA和脂質(zhì)運(yùn)輸來完成細(xì)胞間通訊通路的重要媒介，根據(jù)它們的大小和發(fā)生分為三類，包括外泌體、微泡和凋亡小體。其中，外泌體是直徑大約為40-100nm的包裝囊泡，由多種細(xì)胞分泌，內(nèi)含有特定的蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、細(xì)胞因子或遺傳物質(zhì)。來源于...