所需的CY3-NHS酯的量取決于待標(biāo)記蛋白的量,以及CY3-NHS的比較好摩爾比為10。示例:假設(shè)所需的標(biāo)記蛋白為500μL2mg/mLIgG(MW=150,000),用100μLDMSO溶解1mgCY3-NHS酯,得到所需的CY3-NHS酯體積為5.05μL...
第二種***使用的DNA染色方法是Hoechst染料,**初由化學(xué)公司HoechstAG生產(chǎn)。Hoechst33258、Hoechst33342和Hoechst34580都是鄰苯二甲酰亞胺,具有向A-T富集區(qū)插入的趨勢(shì),因此后者不常使用。與DAPI相似,此類染...
脂質(zhì)體的Zeta電位Zeta電位被認(rèn)為是影響細(xì)胞攝取和藥物傳遞的重要因素之一。與帶電系統(tǒng)相比,膜緊密包裹的中性電荷脂質(zhì)體往往在循環(huán)中停留更長時(shí)間,并表現(xiàn)出更高的藥物保留率。某些血漿蛋白對(duì)脂質(zhì)體具有親和力如果脂質(zhì)體帶電,這種親和力就會(huì)增強(qiáng)。特別是陽離子系統(tǒng)有望迅...
。NLC的設(shè)計(jì)方法是在室溫下將少量脂質(zhì)液體引入SLN中,降低脂質(zhì)**的結(jié)晶度。NLC結(jié)晶度的降低抑制了藥物從基質(zhì)中的排出,增強(qiáng)了納米顆粒的載藥能力和物理和化學(xué)長期穩(wěn)定性。SLN和NLC由脂類和穩(wěn)定劑(如表面活性劑和其他涂層材料)組成。典型的脂類成分如所示,包括...
寡核苷酸脂質(zhì)體 寡核苷酸是一種<50個(gè)堿基的短核酸聚合物。AS-ODN(反義寡脫氧核苷酸)是與互補(bǔ)的mRNA序列結(jié)合的單鏈DNA或RNA。由于AS-ODNs可以下調(diào)某些RNA并抑制靶蛋白的表達(dá),因此它們被認(rèn)為具有作為核酸藥物的潛力。然而,為了開發(fā)基于...
二、***成像分析:D-熒光素,鉀鹽,D-PBS,不含鈣、鎂1、配制溶液使用無菌D-PBS(w/oCa2+;Mg2+)配制D-熒光素鉀鹽溶液(15mg/ml),0.22μm濾膜過濾除菌(避光),分裝后于-20℃或-80℃冷凍保存,避免反復(fù)凍融。使用時(shí)4℃融化,...
注:建議對(duì)每只動(dòng)物模型都需要建立熒光素酶動(dòng)力學(xué)曲線,從而確定比較高信號(hào)檢測(cè)時(shí)間和信號(hào)平臺(tái)期。保存和操作的過程中都要避光。另外水溶性儲(chǔ)存液過濾除菌后,可以-20℃或-80℃分裝凍存,避免反復(fù)凍融。如果有條件,對(duì)儲(chǔ)存液充氮?dú)饣驓鍤猓ǚ乐寡趸€(wěn)定性和保存時(shí)間更長...
CY7是一種CY染料。CY為花菁(Cyanine)的縮寫,是由奇數(shù)個(gè)甲基單元連接的兩個(gè)氮原子組成的化合物。菁類化合物具有波長長、吸收和發(fā)射可調(diào)、消光系數(shù)高的特點(diǎn)CY系染料常被用于蛋白、抗體以及小分子化合物的標(biāo)記,對(duì)于蛋白抗體的標(biāo)記,可以通過簡單的混合反應(yīng)來完成...
酸性環(huán)境(pH值2.0-4.0)通常?于產(chǎn)??于活***物裝載的跨膜pH梯度。在37℃和pH2.0條件下,SM/Chol脂質(zhì)體(55/45,mol/mol)的?解速率?DSPC/Chol脂質(zhì)體慢約100倍。此外,含有SM/Chol的脂質(zhì)體表現(xiàn)出比較好的藥代動(dòng)?...
脂質(zhì)體的Zeta電位Zeta電位被認(rèn)為是影響細(xì)胞攝取和藥物傳遞的重要因素之一。與帶電系統(tǒng)相比,膜緊密包裹的中性電荷脂質(zhì)體往往在循環(huán)中停留更長時(shí)間,并表現(xiàn)出更高的藥物保留率。某些血漿蛋白對(duì)脂質(zhì)體具有親和力如果脂質(zhì)體帶電,這種親和力就會(huì)增強(qiáng)。特別是陽離子系統(tǒng)有望迅...
脂質(zhì)體共價(jià)連接藥物-脂質(zhì)偶聯(lián)載***式通過連接劑將藥物分?與脂質(zhì)共價(jià)連接是另?種在脂質(zhì)體內(nèi)裝載藥物的有效策略,例如Mepact。MDP是主要?蘭?陽性菌細(xì)胞壁的組成部分,具有****應(yīng)答的作?。由于MDP是?溶性低分?量分?,其脂質(zhì)體在儲(chǔ)存過程中存在包封效率低...
Cy3 (Cyanine 3) 是一種發(fā)橘黃色熒光的花青素?zé)晒馊玖?。Cy3染料的激發(fā)峰和發(fā)射峰分別在550 nm和570 nm左右,它的熒光肉眼觀察很明亮,并且對(duì)pH不敏感,在共聚焦顯微鏡中可以用532nm(肩峰)或者556nm(頂峰)的激光束激發(fā),在普通熒光...
與化學(xué)增敏劑共同遞送為了增強(qiáng)***活性,研究人員研究了將***siRNA和化學(xué)藥物共同裝載到陽離子脂質(zhì)體中的共遞送方法。例如,將絲裂原活化的蛋白激酶抑制劑PD0325901包封在由N、N-二油基谷酰胺陽離子脂質(zhì)、DOPE和膽固醇組成的陽離子脂質(zhì)體中,通過靜電相...
固體脂質(zhì)納米顆粒和納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體雖然脂質(zhì)體作為藥物載體是有用的,但它們需要使用有機(jī)溶劑的復(fù)雜生產(chǎn)方法,在包裹藥物方面表現(xiàn)出低效率,并且難以大規(guī)模執(zhí)行。固體脂質(zhì)納米顆粒(SLN)和納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體(NLC)的開發(fā)是為了解決這些缺點(diǎn)。傳統(tǒng)的脂質(zhì)體由液晶脂質(zhì)雙層組...
“主動(dòng)靶向”一詞指的是用特定生物標(biāo)志物標(biāo)記的超聲微泡,允許它們被驅(qū)動(dòng)到特定的目標(biāo)。由于抗體-抗原或配體-受體相互作用的特異性,這種策略可以提高M(jìn)NB遞送的效率??梢允褂酶鞣N配體來提高載藥超聲微泡對(duì)***斑塊的靶向效率和特異性結(jié)合,如碳水化合物、蛋白質(zhì)、核酸和多...
由于阿?卡星在?醇中的溶解度有限,在使??醇輸注制備脂質(zhì)體過程中,阿?卡星轉(zhuǎn)移到半可溶性的凝聚狀態(tài),被包裹在脂質(zhì)體的核?內(nèi)部。令?驚訝的是,獲得了較?的包封效率(在優(yōu)化的制備參數(shù)下,游離藥物為5.2%)和藥脂?(~0.7)。由于其多陽離?性質(zhì),被包封的藥物在脂...
超聲微泡作為納米醫(yī)學(xué),在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的診斷和***方面具有多方面的優(yōu)勢(shì),目前,超聲微泡已發(fā)展為多模態(tài)造影劑、光熱劑和***劑。市面上有各種商用mb造影劑,如Levovist、Definity、option、Sonazoid和Sonovue,具有不同的特性、成分和尺...
微泡空化時(shí)細(xì)胞膜和血管通透性的變化。電子顯微鏡已經(jīng)證明,在細(xì)胞膜內(nèi)產(chǎn)生的小孔與微泡的崩潰和射流的產(chǎn)生有關(guān)。根據(jù)超聲參數(shù),細(xì)胞膜內(nèi)產(chǎn)生的孔隙可能是短暫的,導(dǎo)致細(xì)胞死亡或成功地將外源物質(zhì)引入細(xì)胞質(zhì)。除了改變細(xì)胞膜通透性外,將超聲應(yīng)用于含有微泡的小血管還能改變血管壁...
超聲已被證明可以增強(qiáng)溶栓,超聲與微泡結(jié)合使用,在溶解血栓方面比單獨(dú)使用造影劑或超聲更成功。**近,Unger等人開發(fā)了一種針對(duì)活化血小板的超聲造影劑MRX408。該試劑使用另一種結(jié)合方法,將精氨酸甘氨酸天冬氨酸(RGD)分子直接附著在造影劑的表面。RGD與活化...
超聲微泡能夠在其**中包含各種氣體,如全氟丙烷(C3F8))、氫氣(H2),氮?dú)?N2),一氧化氮(NO),氧氣(O2)和一氧化碳(CO)。這些氣體能夠影響各種生理和病理生理過程,使其在生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用中非常有用,特別是在***方面。建立網(wǎng)絡(luò)需要精確的超聲微泡設(shè)計(jì)...
在各種類型的脂質(zhì)體中,免疫脂質(zhì)體因其靶向能力而受到***關(guān)注。 由于存在附著在其表面的抗體,這些脂質(zhì)體表現(xiàn)出免疫應(yīng)答。免疫脂質(zhì)體的制備, 即抗體與脂質(zhì)體的偶聯(lián),并不是那么簡單, 甚至在其配方過程中可能會(huì)帶來挑戰(zhàn)。 蛋白質(zhì)分子和單克隆抗體可以直接偶聯(lián)到脂質(zhì)體、聚...
5.熒光標(biāo)記的定量分析:通過測(cè)量熒光信號(hào)的強(qiáng)度,可以對(duì)載藥脂質(zhì)體中藥物的含量進(jìn)行定量分析。這對(duì)于確定藥物的釋放量、藥物在體內(nèi)的濃度以及載藥脂質(zhì)體的穩(wěn)定性等方面至關(guān)重要。熒光標(biāo)記可以提供一個(gè)快速、準(zhǔn)確的定量檢測(cè)方法,為藥物輸送系統(tǒng)的研究和應(yīng)用提供了便利。6.探索...
脂質(zhì)體的靶向釋放載藥脂質(zhì)體在體內(nèi)的行為主要受囊泡的吸收、分布和消除等各種藥動(dòng)學(xué)參數(shù)的影響。肝臟、脾臟和骨髓中的固定組織巨噬細(xì)胞是脂質(zhì)體在靜脈給藥后可能進(jìn)入的主要部位。大脂質(zhì)體(>0.5μm直徑)被固定組織巨噬細(xì)胞和血液單核細(xì)胞吞噬。對(duì)于小脂質(zhì)體(<0.1μm)...
microRNA脂質(zhì)體 microRNA是真核細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的短(約22mer)非編碼RNA,通過結(jié)合互補(bǔ)的mRNA序列發(fā)揮生物調(diào)節(jié)劑的作用。miRNA以初級(jí)miRNA的形式從其編碼的核基因轉(zhuǎn)錄,其長度為數(shù)百個(gè)核苷酸。RNaseIII酶,Drosha,將...
超聲微泡造影劑的外殼是有脂質(zhì)組成的,脂質(zhì)殼比其他類型的殼(如聚合物)更不穩(wěn)定,但它們更容易形成并產(chǎn)生更有回聲的微泡。脂類是一大類化合物,由一個(gè)或多個(gè)碳?xì)浠衔锘蛱挤衔镦湽矁r(jià)連接到親水性頭基上,通常由甘油主鏈組成。脂質(zhì)殼比其他類型的殼(如聚合物)更不穩(wěn)定,但...
非病毒載體通常具有比病毒載體更低的轉(zhuǎn)染效率,但由于它們被認(rèn)為要安全得多,因此已被***研究。納米顆粒遞送系統(tǒng),其中陽離子脂質(zhì)納米顆粒通過核酸的負(fù)磷酸基團(tuán)裝載,是一類主要的非病毒載體,顯示出高生產(chǎn)力和裝載效率。用于攜帶核酸的納米顆粒系統(tǒng)在整體上可分為基于脂質(zhì)或聚...
超聲微泡作為納米醫(yī)學(xué),在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的診斷和***方面具有多方面的優(yōu)勢(shì),目前,超聲微泡已發(fā)展為多模態(tài)造影劑、光熱劑和***劑。市面上有各種商用mb造影劑,如Levovist、Definity、option、Sonazoid和Sonovue,具有不同的特性、成分和尺...
熒光染料:能發(fā)出熒光的染料。在吸收紫外線或可見光后,能把短波長的光轉(zhuǎn)變?yōu)椴ㄩL較長的可見光波而反射出來,呈閃亮的鮮艷色彩。例如,酸性曙紅、熒光黃、紅汞以及某些分散染料等。它們大多是含有苯環(huán)或雜環(huán)并帶有共軛雙鍵的化合物。熒光染料可以單獨(dú)使用,也可以組合成復(fù)合熒光染...
為了在體外和體內(nèi)可重復(fù)地傳遞基因和siRNA,含有核酸的脂質(zhì)體、脂叢和多叢的配方需要精確組成轉(zhuǎn)染試劑。雖然有幾項(xiàng)研究已經(jīng)調(diào)查了血液成分如何使脂質(zhì)和聚合物納米顆粒不穩(wěn)定,對(duì)于介導(dǎo)細(xì)胞中基因傳遞或沉默的傳遞系統(tǒng)的**終組成知之甚少。多叢和脂叢的組成在系統(tǒng)給藥進(jìn)入血...
脂質(zhì)體用于**的***LNPs在藥物遞送中的比較大單一應(yīng)用是*****,因?yàn)長NPs包被抗**藥物比游離藥物具有更好的生物利用度和選擇性。脂質(zhì)納米載體降低了***藥物對(duì)正常組織的毒性,增加了疏水藥物的水溶性,延長了藥物停留時(shí)間,改善了對(duì)藥物釋放的控制。LNPs...