數(shù)字PCR的引物和探針設(shè)計(jì)規(guī)則同熒光定量PCR是類(lèi)似的，具體規(guī)則如下：1、查找和選擇目標(biāo)序列設(shè)計(jì)引物和探針的第一步是得到感興趣基因的核酸序列。找到基因保守區(qū)域：基因的保守區(qū)域是指來(lái)自同一屬/種/亞型的、在某個(gè)基因上堿基序列差別很小或沒(méi)有差別的區(qū)域。根據(jù)需要，使用ClustalX或ClustalW等軟件對(duì)齊屬于同一屬/種/亞型的基因的一組序列，在對(duì)齊序列的保守區(qū)域設(shè)計(jì)引物，并確保引物結(jié)合位點(diǎn)處的保守序列與其它非待檢測(cè)的屬/種/亞型的堿基序列具有較大的差異。擴(kuò)增產(chǎn)物長(zhǎng)度（AmpliconLength）：可在75-200bp之間（產(chǎn)物長(zhǎng)度=下游引物位置-上游引物位置+1）。數(shù)字PCR是通過(guò)將一個(gè)樣本分成幾十到幾萬(wàn)份，分配到不同的反應(yīng)單元，每個(gè)單元至少包含一個(gè)拷貝的目標(biāo)分子 。珠三角微滴式數(shù)字PCR生命科學(xué)用品

PCR已成為分子診斷領(lǐng)域重要的技術(shù)手段之一，占據(jù)分子診斷市場(chǎng)的半壁江山。數(shù)字PCR是一代PCR技術(shù)，也是當(dāng)前靈敏度和定量精度比較高的分子檢測(cè)技術(shù)。但數(shù)字PCR使用成本仍然相對(duì)較高，檢測(cè)靶點(diǎn)數(shù)少（一般≤6靶點(diǎn)/反應(yīng)），阻礙了其在臨床中的大規(guī)模應(yīng)用，提高數(shù)字PCR的多重檢測(cè)能力迫在眉睫?；跓晒馔ǖ罃?shù)的增加和基于探針濃度梯度增加，均可以在一定程度上提高數(shù)字PCR檢測(cè)重?cái)?shù)，然而只能達(dá)到"線(xiàn)性"增加的目的?；谔结槤舛忍荻鹊亩嘀貦z測(cè)技術(shù)雖然光'f明顯增加多重能力，但由于無(wú)法避免交叉反應(yīng)現(xiàn)象，不能確保獲得位點(diǎn)特異性的分簇，因此穩(wěn)定性不足、靈敏度較差，難以滿(mǎn)足臨床級(jí)別的數(shù)據(jù)要求。而基于創(chuàng)新的且數(shù)字PCR獨(dú)特適用的熒光編碼技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)“指數(shù)”級(jí)的多重檢測(cè)，顛覆性的提高數(shù)字PCR檢測(cè)重?cái)?shù)，覆蓋臨床應(yīng)用多場(chǎng)景需求。深圳一體化數(shù)字PCR市場(chǎng)前景在使用dPCR進(jìn)行轉(zhuǎn)基因檢測(cè)時(shí)，通常直接參照qPCR的方法。

由于現(xiàn)有的商業(yè)化數(shù)字PCR設(shè)備在物理上只設(shè)置了2個(gè)檢測(cè)通道，所以存在一個(gè)明顯的短板：不能同時(shí)進(jìn)行多個(gè)位點(diǎn)的檢測(cè)。在樣品多位點(diǎn)的檢測(cè)中，就需要更多的起始樣品，但臨床上組織的樣品非常有限。相比之下熒光定量PCR儀上就很容易實(shí)現(xiàn)多重檢測(cè)。為了考察利用數(shù)字PCR實(shí)現(xiàn)多重檢測(cè)的可能性，英國(guó)TheInstituteofCancerResearch的研究人員以非小細(xì)胞肺相關(guān)的KRAS基因?yàn)闄z測(cè)對(duì)象，在Bio-Rad的數(shù)字PCR系統(tǒng)上通過(guò)3個(gè)三重ddPCR檢測(cè)體系來(lái)實(shí)現(xiàn)9個(gè)KRAS突變位點(diǎn)的檢測(cè)。

對(duì)于檢測(cè)需要高靈敏度以及技術(shù)確認(rèn)的情況下，數(shù)字PCR技術(shù)也可以發(fā)揮重要作用。技術(shù)數(shù)據(jù)表明，數(shù)字PCR技術(shù)對(duì)的比較低檢測(cè)下限可到2copies/ml，比qPCR靈敏度提升了100倍。經(jīng)測(cè)試，數(shù)字PCR在檢測(cè)和診斷的某些方面優(yōu)于金標(biāo)準(zhǔn)qPCR，尤其是在低病毒載量樣本中，相比起qPCR，數(shù)字PCR特異性、靈敏度、重現(xiàn)性和檢測(cè)限受影響更小。因此，未來(lái)預(yù)計(jì)數(shù)字PCR技術(shù)也將在類(lèi)疾病中得到更加廣的應(yīng)用。數(shù)字PCR的應(yīng)用甚廣，除了可應(yīng)用于進(jìn)行突變的檢測(cè)以外，也可運(yùn)用于基因擴(kuò)增的檢測(cè)。通過(guò)數(shù)字PCR技術(shù)可建立多重?zé)晒怏w系，用于同時(shí)檢測(cè)比如非小細(xì)胞肺中常見(jiàn)的MET和HER2耐藥擴(kuò)增。有研究報(bào)道，使用數(shù)字PCR技術(shù)對(duì)436例非小細(xì)胞肺樣品進(jìn)行檢測(cè)，并挑選樣本驗(yàn)證了數(shù)字PCR與RNA fish的檢測(cè)一致性。結(jié)果表明，該數(shù)字PCR技術(shù)在保證了基因擴(kuò)增檢測(cè)準(zhǔn)確性的同時(shí)，還節(jié)約了檢測(cè)時(shí)間。dPCR可直接溯源SI國(guó)際單位制摩爾，適合單一、雙重及多重轉(zhuǎn)基因標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究，一次可識(shí)別不同的轉(zhuǎn)基因區(qū)域。

基于數(shù)字PCR技術(shù)平臺(tái)，塔歌生物成功地開(kāi)發(fā)了胎兒染色體非整倍體(T21,T18和T13)無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前篩查試劑盒（數(shù)字PCR-NIPT），并已完成數(shù)百例臨床樣本驗(yàn)證。數(shù)字PCR-NIPT的陽(yáng)性檢出率和NGS相似，且成本接近血清學(xué)，可以在上述應(yīng)急策略中取代血清學(xué)作為靈敏度和特異性更高的初篩方法，以有效提高陽(yáng)性檢出率，降低需要復(fù)篩的假陽(yáng)性樣本數(shù)和節(jié)省總的篩查成本。數(shù)字PCR應(yīng)用前景廣闊，可用于病原微生物檢測(cè)、基因檢測(cè)、無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前篩查、測(cè)序結(jié)果驗(yàn)證等領(lǐng)域。但目前，大多數(shù)醫(yī)院采購(gòu)的數(shù)字PCR儀器是用于科研層面，在臨床應(yīng)用上仍處于起步階段，未得到普遍應(yīng)用。數(shù)字PCR的應(yīng)用甚廣，除了可應(yīng)用于進(jìn)行突變的檢測(cè)以外，也可運(yùn)用于基因擴(kuò)增的檢測(cè)。珠三角全自動(dòng)多重?cái)?shù)字PCR油滴制造

國(guó)產(chǎn)dPCR企業(yè)在上述應(yīng)用領(lǐng)域不斷與伯樂(lè)、賽默飛、羅氏、凱杰、因美納等頭部企業(yè)展開(kāi)競(jìng)爭(zhēng)，搶占市場(chǎng)份額。珠三角微滴式數(shù)字PCR生命科學(xué)用品

數(shù)字聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（digitalpolymerchainreaction，dPCR）技術(shù)因具有高靈敏度、受基質(zhì)干擾少等優(yōu)勢(shì)而被廣用于轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè)。本研究綜述了數(shù)字PCR技術(shù)的原理、系統(tǒng)各部件的優(yōu)劣勢(shì)，梳理了數(shù)字PCR技術(shù)在轉(zhuǎn)基因檢測(cè)與溯源技術(shù)（標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)）方面的進(jìn)展和發(fā)展趨勢(shì)，以期為轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè)領(lǐng)域提供參考依據(jù)。dPCR的擴(kuò)增過(guò)程大致上可以分為3步：樣品的分散、樣品的熱循環(huán)擴(kuò)增和樣品的檢測(cè)。對(duì)于數(shù)字PCR儀器系統(tǒng)，各個(gè)部件之間仍然有較大的改進(jìn)空間，要發(fā)揮部件之間的協(xié)同作用是很重要的，而且有持續(xù)研究的價(jià)值。表1中總結(jié)了部分常見(jiàn)的數(shù)字PCR系統(tǒng)的類(lèi)型，以及相對(duì)在硬件、便攜性、性?xún)r(jià)比和自動(dòng)化程度上的比較。珠三角微滴式數(shù)字PCR生命科學(xué)用品

雙螺旋科學(xué)儀器，2015-04-17正式啟動(dòng)，成立了數(shù)字PCR，純水機(jī)，病理切片機(jī)，倍性分析儀等幾大市場(chǎng)布局，應(yīng)對(duì)行業(yè)變化，順應(yīng)市場(chǎng)趨勢(shì)發(fā)展，在創(chuàng)新中尋求突破，進(jìn)而提升臻準(zhǔn),美國(guó)艾科浦,銳訊生物,Sysmex,Eprerdia的市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力，把握市場(chǎng)機(jī)遇，推動(dòng)精細(xì)化學(xué)品產(chǎn)業(yè)的進(jìn)步。業(yè)務(wù)涵蓋了數(shù)字PCR，純水機(jī)，病理切片機(jī)，倍性分析儀等諸多領(lǐng)域，尤其數(shù)字PCR，純水機(jī)，病理切片機(jī)，倍性分析儀中具有強(qiáng)勁優(yōu)勢(shì)，完成了一大批具特色和時(shí)代特征的精細(xì)化學(xué)品項(xiàng)目；同時(shí)在設(shè)計(jì)原創(chuàng)、科技創(chuàng)新、標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范等方面推動(dòng)行業(yè)發(fā)展。我們?cè)诎l(fā)展業(yè)務(wù)的同時(shí)，進(jìn)一步推動(dòng)了品牌價(jià)值完善。隨著業(yè)務(wù)能力的增長(zhǎng)，以及品牌價(jià)值的提升，也逐漸形成精細(xì)化學(xué)品綜合一體化能力。公司坐落于廣州市黃埔區(qū)銳豐三街4號(hào)617房，業(yè)務(wù)覆蓋于全國(guó)多個(gè)省市和地區(qū)。持續(xù)多年業(yè)務(wù)創(chuàng)收，進(jìn)一步為當(dāng)?shù)亟?jīng)濟(jì)、社會(huì)協(xié)調(diào)發(fā)展做出了貢獻(xiàn)。